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T25瓶细胞处理方法

发布时间:2020/8/27 15:28:16      阅读次数:3135

T25瓶细胞处理方法

收到细胞后,检查外包装是否完整,细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题,请即时联系。并进行以下操作:

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理,以稳定细胞状态。

3. 预热培养基(含10%胎牛血清,1%双抗)。

4. 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存40×,100×,200×各一张)。

5. ①若细胞密度较小,无菌操作,去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上,进行传代。

②若细胞密度较大,达到80%以上,将细胞传培养。

T25瓶细胞处理方法注:

培养瓶里的培养基血清浓度为5%,建议更换成自己配好的新鲜培养基。由于运输过程中的问题,细胞培养瓶中的贴壁细胞有可能从瓶壁中脱落下来,显微镜下观察会出现细胞悬浮的情况,这时请在拍照后将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基。(这里是针对原来完全培养基FBS浓度是10%的情况,如果原来FBS浓度是20%,可以增加到25%FBS浓度)   收到细胞后如细胞状态不佳或培养中遇到问题,烦请当天尽快联系并提供图片,以便售后处理。7天内反馈,细胞本身问题免费重发如人为原因导致可根据实际情况酌情处理;7天内未接到任何反馈视为合格,不予免费售后

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