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发布时间：2020/11/2 7:55:49 阅读次数：591
| 香菇源性成分探针法荧光定量 PCR 试剂盒产品及特点 | 本试剂盒可用于检测食品或其他材料中是否有香菇的成分。现代食品加工工艺极大改变了食材原有的味道、气味、色泽、纹理和质地等特性，因此传统的感官鉴别技术已经无法对食材的真伪进行准确的鉴定。同时部分食材还有致敏性，因此基于基因检测的快速灵敏的食材来源检测技术将对食品监管和安全提供重要的保障。本产品就是为满足这一需求根据探针法 qPCR 原理开发的产品，它具有下列特点： 1. 即开即用，用户只需要提供样品 DNA 模板。 2. 根据香菇保守区域设计引物和探针，能专一性地检测出样品中的香菇成分，但不能检测其他非香菇成分。 3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。 4. 一管式闭管操作，降低了交叉污染。 5. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。 6. 对混合样品中香菇成分的检测下限为 0.01%，对样品中香菇成分的核酸检测下限为 0.1ng/µL。 7. 本只能用于科研，足够 50 次 20uL 体系的荧光定量 PCR。 | ||||
| 规格及成分 |
| 成分 | 编号 | 十孔盒包装 |
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| 2×Probe qPCR MagicMix | 190303 | 1 mL（棕色盖） | |||
| 荧光PCR 专用模板稀释液 | 180701 | 1 mL（黄盖） | |||
| 香菇源性成分探针法 qPCR 引物混合液 | 15-971yw | 100 uL（白盖） | |||
| 香菇源性成分 qPCR 探针 | 15-971pb | 50 uL（棕色管） | |||
| 香菇源性成分探针法 qPCR 阳性 对照（1×10E8 拷贝/uL） | 60908-502pc | 50 uL（黄盖） | |||
| 61202 | 20 次（1mL，绿盖） | ||||
| 使用手册 | 15-971sc | 1 份 | |||
| 运输及保存 | 低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较 高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。 | ||||
| 自备试剂 | DNA 模板 | ||||
| 香菇源性成分探针法荧光定量 PCR 试剂盒使用方法 | 一、稀释标准曲线样品（以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例）。由于标 准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。 1.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。 2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同）。 3. 在 7 号管中加入 5 μL 阳性对照（浓度为 1×10E8 拷贝/μL，试剂盒提供)，充分 | ||||
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| 预变性 | 95℃ | 15 min |
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| PCR 反应 （40 个循环） | 95℃ | 15sec | |||
| 60℃ | 60sec（采集 FAM 通道的荧光信号） | ||||
| 五、数据处理 11. 如果把本试剂盒用于定量检测，则以阳性对照浓度的 log 值为横轴，以 Ct 值为纵轴，绘制标准曲线。再以待测样品的 Ct 值从标准曲线上推算出样品 DNA 浓度的log 值，再推算出其浓度。 12. 如果把本试剂盒用于定性检测，只判断阳性或阴性，则阴性对照 Ct 必须大于或等于 40。阳性对照必须有荧光对数增长，有典型扩增曲线，Ct 值应该小于或等于30。对待测样品，如果其 Ct 大于或等于 40 则为阴性，如果小于或等于 35 则为阳性。如果在 35-40 之间，则重复一次。重复实验的 Ct 值如果大于或等于 40 则 为阴性，如果小于 40，则为阳性。 | |||||
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