试验前请仔细阅读说明书，本产品仅供科研实验使用。
1. 所购产品均质量保证！
2. 试剂盒方面提供技术指导，Elisa试剂盒还可以提供代检测服务。
3.本公司出售的任何产品均保质保量，除以下情况，客户可联系我公司申请退换货售后服务
以下情况不予办理退换货：
1、已超过受理期限的产品，如过保质期。
2、由于客户自身操作原因导致实验失败。
3、由于客户没有仔细确认要订购的指标，导致自己的指标定错。
4、产品已使用（质量问题除外）。
柱式病毒 DNAOUT是在一管式病毒 DNAOUT 的基础上开发的、专门用于从血清(血浆)等液体样品及拭子（咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、阴道拭子等）中提取微量病毒DNA 的产品，
它具有下列特点：
1. 操作简单，整个过程只需要 20 分钟左右，不需要额外在洗柱液中补加乙醇。
2. 灵敏度高，通过 PCR 检测到的最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
3. 安全无毒，不需要使用苯酚和氯仿等有机溶液。
4. 如果加上病毒离心富集步骤，最多可以处理 1.5 mL 液体病毒样品。
5. 与 PCR 和荧光 PCR 兼容。
6. 价廉物美，性价比远高于国外同类产品。
7. 适用于各种材料，包括血清、血浆、脑脊液、尿液、粪便、培养细胞上清液等无细胞材料。
1. 如果有 N 个样品，标记 N+2 个 1.5-2 mL 螺旋盖塑料离心管(如 Sarstedt，多出的一个为阳性对照，一个为阴性对照。为避免污染，建议不要使用压盖式塑料离心管。在每个管上做个标记，以在后续操作时区别向心面和离心面。然后在离心管中分别加入 0.2 mL 液体样品（血清、血浆、尿液、脑脊液、唾液、眼泪等等），阳性对照和阴性对照。
1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各种拭子样品，则将拭子放入 0.2mL 自备生理盐水中挤压出液体，然后取 0.2mL 进行提取。
1.2、 如果是粪便等半固定样品，则取约 0.3mL 的样品，加入 0.3mL 自备生理盐水，震荡重悬，离心取 0.2mL 上清进行提取。
1.3、 如果血液，细胞培养液等含细胞的液体，可以离心用上清，也可以直接取用，但后者提取的病毒 DNA 中会有少量细胞的基因组 DNA 污染（但不影响 PCR）。血浆的抗凝剂必须是 EDTA 或 ACD，不能是肝素。使用ACD 时由于所加入 ACD 会增加体积，样品会被稀释，得到的病毒滴度会比使用 EDTA 低 15%左右。血浆最好按 0.6mL/管的量分装保存，以避免反复冻融。
1.4、 如果样品是实体组织或培养细胞，则需要在自备生理盐水中匀浆后离心，用 0.2mL 上清液（含病毒）进行提取，但此种情况下最后得到的病毒DNA 不可避免的会含有少量基因组 DNA 污染（但不影响 PCR 检测）。
1.5、 如果液体样品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的液体在 4℃ 24,000 g 冷冻离心 60 分钟, 移弃 1.3 mL、用剩下的 0.2mL 继续操作。
2. 加入 0.6 mL DNA 病毒裂解液到各离心管中，振荡 30 秒混匀后室温放置 10 分钟裂解病毒。注意：DNA 病毒裂解液在 4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 加入 0.8mL 上柱结合液到离心管中，颠倒混匀后转移一半的混合液（0.8mL）到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。
4. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
5. 将剩余的另外一半裂解液（0.8mL）转移到离心吸附柱中，室温放置 2 分钟。
6. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入 0.7 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。
8. 加入 0.3 mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，12,000 rmp 室温离心 1 分钟，弃收集管中的穿透液，把离心吸附柱放回到收集管中。此为第二次洗涤，可以跳过。
9. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟（干甩），弃含穿透液的离心管。
10. 将干甩后的离心吸附柱套入到一个自备的 RNase-free 的 1.5 mL 离心管中，在离心吸附柱的滤膜的中部加入 30-100 uL DNA 洗脱液 3.0，然后室温放置 2 分钟。
11. 12,000 rpm 室温离心 1 分钟，离心管中的溶液即为病毒 DNA 溶液。
12. DNA 样品可以直接用于 PCR，也可放-20℃长期保存。
注：病毒提取的核酸量远不足以电泳检测，提取后可通过 PCR 检测，最终灵敏度可以达到 30-50 拷贝/mL。
Q：提取液体样品/病毒核酸(RNA 或 DNA)为何很难？
A：原因一是量少。病毒颗粒中的 RNA 或 DNA 是作为遗传物质保存，每个病毒最多
只携带几个拷贝(而一个细胞中有上万种 RNA 分子，每种 RNA 有很多拷贝)，同时
其长度也十分有限(一般不到细胞基因组的万分之一)，样品中病毒数往往又不是很
多，使得样品中病毒核酸的绝对量往往比一个细胞中核酸的绝对量还少，所以操
作中十分容易丢失。另外，由于得到的核酸绝对量很少，不能使用电泳和测 OD
检测，只能通过 PCR 或 RT-PCR 检测，而 PCR 或 RT-PCR 的条件又需要优化，
所以要确定提取是否成功十分不容易。
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