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RNALater™血液RNA稳定保存液

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 RNALater™血液RNA稳定保存液(RNALater™ RNA Stabilization Reagent for Blood),简称血液RNALater™或血液RNALater™试剂,是一种用于采集血液样品时,仅需室温操作,即可迅速抑制RNase并稳定保存血液样品中RNA的无毒无害液态试剂。本产品广泛用于新鲜血液样品中RNA的稳定保存。

本产品的使用效果和液氮冻存的效果一致。本产品可以迅速渗透到血液细胞内部,完全抑制RNase,避免RNA降解,保持血液样品RNA的完整性,从而完美保存血液细胞的基因表达谱和细胞外的RNA谱,并且和液氮一样可以长期保存样品中的RNA。

本产品安全便捷。本产品无任何毒性和刺激性,可室温使用,确保了使用时的安全和便捷。和使用液氮相比,可以有效避免因使用超低温的液氮而可能引起的冻伤、离心管爆裂等安全隐患,并且携带、运输非常方便。

本产品可稳定血液样品的RNA表达谱。常见的血液样品保存方式是4℃短时间保存,但此时血液中细胞的生命活动还在进行,基因表达谱还会发生变化,RNA提取时与血液样品收集时的基因表达谱很可能已经出现显著差异,这种显著的差异很可能会导致实验结果的不确定性。而使用血液RNALater™试剂保存后,血液中细胞的生命活动几乎立即被终止,RNA谱也被固定,且RNA完整性更佳(图1B)。经测试,直接将全血置于-80℃条件下保存会导致部分RNA降解(图1B),可能原因是在冻存和解冻过程中细胞受到破坏,细胞内的RNase释放而导致部分RNA降解。因此,不建议直接将全血置于-80℃条件下保存。

本产品适用于普通新鲜血液样品中RNA的稳定和保存,更加适合样品收集后不能够立即进行RNA抽提(包括miRNA等小RNA)的情况,特别适用于野外或临床采集的样品、大批量采集的血液样品和不能立即冻存的血液样品RNA的稳定与保存。

在本产品中样品的保存时间和存储温度相关,例如37℃可保存1-2天,室温可保存一周,4℃可以保存1个月,-20℃或更低温度可以更长时间保存。具体如下表所示:

存储温度 37℃ 25℃ 4℃ -20℃或更低温度
保存时间 1-2天 1周 1个月 >6个月

抽提得到的病毒RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection30 assay、cDNA克隆等下游实验;也可用于基因表达芯片分析(microarray)、高通量测序(high throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。

本产品对于小鼠血液样品的保存效果如图1所示。全血样品用本产品分别在4℃分保存30天、室温保存7天以及37℃保存1天后,抽提获得的RNA与新鲜样品(Control, ctrl)一样均能够保持完整性,几乎无降解;而直接将血液在25℃保存7天,大部分RNA都已经被降解(图1A)。在4℃条件下保存,血液RNALater™试剂的保护效果更好;而直接将全血置于-80℃条件下保存,3天时RNA已有部分降解,但血液RNALater™试剂保护的样品几乎无降解。

图1. RNALater™血液RNA稳定保存液对于小鼠全血中RNA的稳定保存效果图。按照图中所示条件保存后,使用RNAeasy™动物RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0024/R0026/R0027)抽提RNA,随后取相同体积的RNA样品进行电泳。其中图A为RNA样品变性处理后,在含6.67%甲醛和适量NA-Red (D0128)的1%变性琼脂糖凝胶中进行电泳检测,图B为含NA-Red (D0128)的1%琼脂糖凝胶电泳检测。本图仅供参考。

本产品也可用于血液样品中蛋白和DNA的稳定和保存,但血液RNALater™试剂会导致蛋白变性,后续可进行Western blot、SDS-PAGE等实验,而不适用于检测酶活力等须保持蛋白活性的实验。

按照每200µl血液样品使用1ml本产品来计算,本产品100ml包装可以用于约100份血液样品的保存, 500ml包装可以用于约500份血液样品的保存。

包装清单:

产品编号 产品名称 包装
R0116-100ml RNALater™血液RNA稳定保存液 100ml
R0116-500ml RNALater™血液RNA稳定保存液 500ml
说明书 1份

保存条件:

室温或4℃保存,两年有效。

注意事项:

本产品适合新鲜血液的保存,血液样品获得后需要尽快使用本产品保存。

样品如果需要-20℃或-80℃长期保存,应先置于4℃保存过夜或更长时间后才能再转移至-20℃或-80℃保存,以保证血液RNALater™试剂充分有效地完全渗透血液细胞内部。

-20℃或-80℃保存情况下,样品解冻时血液RNALater™试剂中可能有结晶析出,属正常现象,可待结晶完全溶解后使用,不会影响后续RNA的抽提效果。

所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染,可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜,然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话,以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

对于操作环境中RNA酶的去除,推荐使用生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 
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