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粪便DNAOUT

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 动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞,还可能有肠道病原菌,因此通过PCR对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和肠道传染病的重要方法,具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行跟踪和遗传分析。但粪便中成分复杂多变,常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分,所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。本产品是针对这一问题推出的、专门用于从各种动物粪便中提取DNA的试剂。其特点如下:

1. DNA纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可

以直接用于PCR扩增。

2. 每次微量提取可以处理100-300 mg左右的样品,能得到5 μg 左右DNA,片段长度在30 Kb左右。

3. 可以同时提取到肠道上皮细胞和可能的肠道病原菌的DNA。

4. 操作过程简单快速,只需要30分钟。

5. 扩容性好,既可以在1.5 mL离心管中微量提取,也可以在50 mL离心管中进行大规模制备。

试剂无毒无害,环保。

将0.1-0.3克左右的样品与500 μL溶液A混合,剧烈振荡5-10分钟,65℃保温5 分钟,离心2分钟,将上清液转移到新的离心管中,加入500 μL溶液B,冰浴5分钟, 离心2分钟,将上清液转移到新的离心管中,加入200 μL氯仿,振荡30秒混匀,离心2分钟,将上清液转移到新的离心管中,加入2倍体积的乙醇,混匀后离心10分钟,
弃上清,1 mL 75%乙醇洗两次即得DNA
用和本产品分别从约300 mg动物粪便中提取DNA,最后得到的DNA溶液为50 μL,15 μL用于电泳, 使用的染料为绿如蓝, 两份样品完全相同。
 
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