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柱式植物DNAOUT

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 本产品是在植物DNAOUT基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品,可以用于多种植物基因组DNA的超纯提取。

1. 纯度高,不含污染和抑制剂,得到的DNA可以不经稀释直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。

2. 产率一般在10-30 μg/100 mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。

3. 适用范围广,可用于绝大多数植物的各种组织,包括富含多糖的组织。

不会发生离心柱堵塞现象,不需要使用酚和氯仿等有毒试剂。

 

 

将约100-300  mg克剪碎的植物组织直接加到1  mL溶液A中匀浆,65℃保温5分钟后离心1分钟,在上清中加入等体积溶液B,混匀后冰浴5分钟,离心1分钟, 在上清中加入1.5倍体积的溶液C,混匀后转移到离心吸附柱中,室温放置5分钟后离心半分钟,加0.1 mL膜结合RNA清除液到离心吸附柱中,室温放置5-10分钟,用通用洗柱液洗两次,空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中,加0.1 mL DNA洗脱液,室温离心1分钟即得植物DNA溶液。

 

用本产品提取的万年青叶片基因组DNA的电泳图,每个样品使用量为100 mg叶片,最后洗脱体积均为50 μL,上样体积为10 μL,最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为绿如蓝染料,电泳缓冲液为超快电泳液(实验编号:304242)

   

 

 

使用本产品时,能否使用液氮研磨法破碎植物组织?                        A:研钵一般都是二氧化硅构成,在裂解液中会吸附核酸,故最好不要使用

 

 

用本产品提取的100 mg油菜叶片基因组DNA,采用液氮研磨法(左边两个样品)和Polytron匀浆法(右边两个样品),洗脱体积均为50μL。上样体积为10 μL,最后在0.8%琼脂糖凝胶中电泳后紫外观察。使用的染料为绿如蓝染料,电泳缓冲液为超快电泳液(实验编号:304242)。

 

 

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