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中草药DNAOUT

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 基于PCR的中药分子鉴定方法是辨别中药真伪,保证药材质量,促进中药产业现代化的十分重要的手段。但由于日晒,高温烘烤等处理极大地破坏了中药材DNA 的完整性;处理过程中多酚多糖及其氧化物也会与DNA发生复杂的化学反应,所以从中药材中提取可以用于PCR的DNA比从新鲜植物中提取要困难很多。为解决这一问题,在植物DNAOUT产品基础上开发了本产品。其特点如下:

1. 适合于大多数药材。

2. 得到的DNA纯净,OD260/280一般都在1.6以上,原液或100倍之内的稀释液   一般都能直接作为PCR模板。

3. 操作简单,整个过程只需要三十分钟左右。

试剂无毒无害,环保卫生


称取20 mg左右中药材,剪碎或研磨碎,加入0.75 mL  预热溶的溶液A,匀浆,65℃水浴5  分钟,加入等体积溶液B,振荡30秒混匀,冰浴5分钟,室温离心5分钟,上清中加入0.2 mL氯仿,振荡后室温离心3分钟,重复氯仿抽提一次,上清中加入1倍体积异丙醇,室温离心5分钟,弃上清,用75%乙醇洗沉淀两次即得DNA


图注:用本产品提取的中草药DNA 溶液的原液作为模板进行植物专一性PCR扩增,模板体积占PCR 体系(50 μL)的1/101-4分别表示党参、柴胡、桔梗、车前子DNA样品。电泳上样量为20 μL),PCR片段长约500  bp左右,MDL 2000


麻黄

Caulis Ephedrae

1.68

原液

肉桂

Cortex Cinnamomi

1.73

原液

当归

Radix Angelica

1.69

1/100稀释液

天冬

Radix Asparagi

1.50

原液

柴胡

Radix Bupleuri

1.60

原液

菊花

Flos Chrysanthemi.

1.78

1/10稀释液

党参

Radix Codonopsis

1.72

原液

甘草

Radix Glycyrrhizae

1.80

原液

板蓝根

Radix Isatidis

1.68

原液

车前子

Semen Plantaginis

1.60

原液

桔梗

Radix Platycodi

1.68

原液

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