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柱式真菌DNAOUT

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 本产品是真菌DNAOUT的柱式升级产品,能够破裂各种真菌坚硬的外壳。同时使用硅胶膜DNA纯化技术,得到的DNA适用于各种后续实验。

 

1. DNA纯净,OD260/280一般都在1.9左右。可直接用于PCR、酶切、杂交  等。DNA产量在2-10 μg/mL饱和菌液,DNA片段大小在30-50 Kb左右。

2. 操作简单,整个过程约15分钟。

3. 能处理真菌菌丝、孢子和子实体等各种形式的真菌样品。

4. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。

5. 适合于各种真菌,包括酵母(Scerevisiae、Spomb、Pichia pastoris、Cryptococcus neoformans、Myxozyma mucillagina )、动物病原真菌(如:Candida albicans、Aspergillus niger )和植物病原真菌(如: Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。

 ​0.1-3 mL 真菌细胞沉淀或0.1g左右的真菌菌丝、孢子和子实体在液氮中研磨,转移到1.5 mL塑料离心管中,加入1 mL溶液A,吹打混匀,65℃保温5分钟后离心1分钟,转移上清到一新离心管中,加入等体积溶液B,混匀,冰浴5分钟,离心1分钟,转移上清到一新离心管中,加入1.5倍体积的溶液C,混匀后转移到离心吸附柱中,室温放置5分钟后离心半分钟,用通用洗柱液洗两次,空甩半分钟,将离心吸附柱转移到新的离心管中,加0.1 mL DNA洗脱液,室温离心1分钟即得DNA

用本产品提取Candida albicansA  Saccharomyces cerevisiaeB、和Aspergillus niger C)三种真菌的基因组DNA,最后用20 μLDNA洗脱液洗脱,取10 μL上样,在0.8%琼脂糖凝胶和1×SuperBuffer-2300 V电泳5分钟后直接在UV下照相。使用的染料是绿如蓝。

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