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玻璃珠法柱式真菌DNAOUT

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 真菌DNA提取是一个难题,一是因为真菌有菌丝体、孢子等多种完全不同的结构形态,二是因为其细胞壁一般都很厚,比较难以破碎。本产品是液氮研磨法柱式真菌DNAout的姊妹产品,它利用 法破碎细胞,主要用于从真菌孢子和液体培养的真菌细胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNAOUT采用液氮研磨法破碎细胞,适用于从真菌菌丝体中提取其基因组DNA)。本产品具有下列特点:

1. 即开即用,提供包括玻璃珠、离心吸附柱在内的所有试剂和耗材。

2. 采用玻璃珠法破碎细胞,属于物理方法,远比基于蜗牛酶或破壁酶的温和化学破壁法重复性好,也不容易带入外源真菌DNA(注:文献报道蜗牛酶或破壁酶中常常有外源真菌DNA污染,用于提取真菌DNA往往会造成污染)。

3. 本方法提取一个样品只需要10余分钟,方便、快速和高效。

4. 一次可以处理5 mL的过夜真菌培养物,所得的基因组DNA OD260/OD280 一般都在1.8左右,长度一般在20 Kb左右,每mL菌液的DNA产率一般在1-3 μg。可以直接用于PCR和酶切等后续试验。


离心收集1-5 mL过夜培养的真菌细胞,加入0.5 mL 溶液A和体积相当于0.5 mL的玻璃珠(大约0.5),振荡器上以最高速度振荡10分钟,再加入0.5 mL溶液B,震荡2分钟,2000 rpm离心2分钟,在上清中加入3倍体积的溶液C,上柱, 用通用洗涤液洗两次,干甩一次,最后用50-100 μL DNA洗脱液洗脱基因组DNA 待用

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