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大提柱式真菌DNAOUT

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 本产品在柱式真菌DNAOUTCAT#:70901)基础上改良而得的大提升级产品,主要用于大量快速从各种真菌材料中提取基因组DNA。跟柱式真菌DNAOUT相比,它具有下列特点:

1. 处理量大,一次可以处理1-3克各种真菌组织。

2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以 不经稀释直接用于酶切、PCR real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting,microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。

3. 产率一般在10-100 μg/g真菌样品。离心吸附柱最大吸附量为800 μg。

4. DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。

5. 适用范围广,适用于绝大多数真菌材料,包括酵母Scerevisiae,S. pomb,Pichia pastoris)等。

 

使用及效果

10-30 mL 真菌细胞沉淀或1-3  g左右的真菌菌丝、孢子和子实体在液氮中研磨,转移到50 mL塑料离心管中,加入10 mL溶液A和0.1 mL RNase A,吹打混匀,65℃保温5-10分钟后离心5分钟,转移上清到一新的50  mL离心管中,加入等体积溶液B,混匀后冰浴5分钟,离心5分钟,再转移上清到一新离心管中,加入1.5 倍体积(跟总体积比)的溶液C,混匀后转移到大提离心吸附柱中,室温放置5分钟后离心5分钟,用25 mL通用洗柱液洗两次,空甩半分钟,将大提离心吸附柱转移到新的50 mL离心管中,加1 mL DNA洗脱液,室温离心即得DNA。

 

用本产品提取15 mL过夜培养的比赤酵母菌液,最后用1 mL洗脱,取10 μL0.8%琼脂糖凝胶中,300V电泳5分钟,染料为绿如蓝,缓冲液为SuperBuffer-2

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