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大提柱式细菌DNAOUT

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 本产品在柱式细菌DNAOUTCAT#:60802)基础上改良而得的大提升级产品,主要用于大量快速从各种革氏阳性和革氏阴性细菌材料中提取基因组DNA。跟柱式细菌DNAOUT相比,它具有下列特点:

1. 处理量大,一次可以处理30 mL的饱和菌液。

2. 纯度高,OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制剂,得到的DNA可以 不经稀释直接用于酶切、PCR real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting等各种后续分子生物学实验。

3. 产率一般在5 μg/mL细菌样品。离心吸附柱最大吸附量为200 μg。

4. DNA片段长度一般在20-40 Kb左右。

5. 适用范围广,适用于绝大多数常见的细菌材料。

 

 

对革氏阴性细菌:将30 mL过夜培养的细菌在50 mL离心管中离心沉淀,弃上清,加入6 mL溶液A,吹打均匀后加入3 mL  溶液B,颠倒混匀,加入5  mL自备氯仿,振荡混匀3分钟,室温离心5分钟,转移上清到新的50 mL离心管中,加入1.5倍体积的溶液C和溶液D的混合溶液,混匀后转移到大提离心吸附柱中,室温放置3-5 分钟,离心2分钟,用10 mL通用洗柱液洗2次后,用1 mL通用预洗脱液洗1次,加1 mL DNA洗脱液洗脱即得细菌基因组DNA溶液。对革氏阳性细菌:增加一步溶菌酶预处理步骤,其余相同。

 

用本产品提取30 mL DH5α E.coli 的基因组DNA,最后用1 mL DNA洗脱液洗脱四次, 各取10 μL上样,在0.8%琼脂糖凝胶和1×SuperBuffer-2300 V电泳5分钟后直接在UV灯下照相。使用的染料是绿如蓝。DNA 产量是160 μgOD260/2801.74(实验编号:305083)

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