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柱式质粒 DNAOUT

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 本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理, 再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全套操作可以在30分钟之内完成。其操作流程如下:

 

 

使用本试剂盒可从1-5 mL过夜培养的菌液纯化得到高达20 μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

1. 快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。

2. 不需要预平衡离心吸附柱。

3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。

4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD比值在1.8-2.0之间。

5. 产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5 μg/mL。

6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。

7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。

 

在1.5 mL离心管收集1-4 mL过夜培养饱和菌液,离心1分钟,用和0.25 mL溶液A重悬沉淀,再与0.25 mL溶液B混匀,再加入0.35 mL溶液C,混匀,室温静止2分钟,离心10分钟,将上清转移到DNA纯化柱中,静置2分钟,离心1分钟,弃收 集管中的废液,加入0.5 mL的通用洗柱液,离心1分钟,弃废液,重复上一步1次。离心1分钟,甩干残留液体,将DNA纯化柱置于新的1.5  mL离心管(自备)中,加入适量(30—100 μL)DNA洗脱液离心即得质粒DNA。

 

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