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PCR产物纯化试剂盒

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 试剂盒内容及保存:

试剂盒组成

RTP2202-01

50次)

RTP2202-02

100次)

贮存方式

结合液PB

50 ml

100 ml

室温

3 M NaAc pH5.2

500μl

500μl

室温

漂洗液PW

15 ml

2×15 ml

室温

洗脱缓冲液EB

15 ml

15 ml

室温

吸附柱CA2

50

100

室温

收集管(2 ml

50

100

室温

说明书

1

1

 

 

储存条件:

本试剂盒在室温(15–25℃)干燥条件下,可保存12个月;更长时间的保存可置于2–8℃。(注意:当低温贮存时,使用前应先将试剂盒内的溶液在室温中放置一段时间,必要时可在37℃水浴中预热10-20分钟,以平衡溶液温度。)

 

产品简介:

本试剂盒采用离心吸附柱结合独特的缓冲液系统,从酶切、PCR等反应溶液中纯化DNA片段,同时除去蛋白质、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒可回收100bp–10kbDNA片段,回收率大于80%<100 bp >10kb DNA片段回收率为3050 %)。

每个吸附柱每次最多可吸附的DNA量约为10 μg

使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、测序、文库筛选、连接和转化等实验。

 

产品特点:

结合液PB为亮黄色,便于观察体系的pH是否合适。

操作快捷,单个样品操作少于10分钟。

 

操作步骤:

如非指出,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。

PCR反应液中直接加入5倍体积的PB液,颠倒混匀后,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g离心30-60秒,到掉收集管中的废液,将吸附柱CA2重新放入收集管中。

注:● 如果PCR反应体系使用了石蜡油,无需去除,但要使用10倍体积的PB液。

 如果反应体系小于50μl,用水补至50μl体系,再加入PB液。

 如果体系体积大于700μl,请分次上柱,保证全部溶液均加入到吸附柱中。

向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW使用前请先检查是否已加入无水乙醇),10,000g离心30-60秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。

向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW10,000g离心30-60秒,倒掉废液。

将离心吸附柱CA2放回收集管中,10,000g离心2分钟,尽量除去漂洗液。

注意:此步必不可少!如果漂洗液有残留,将会影响回收效率和DNA质量,进而影响下游实验;离心后将吸附柱盖子打开,室温放置2分钟,这样将有助于彻底挥发残余乙醇。

将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,室温放置2分钟。10,000g离心2分钟收集DNA溶液。

注意:

● 可将洗脱缓冲液EB预热到60-70后再加到吸附膜上,这样可以提高洗脱效率。

● CA2柱的洗脱体积不应少于20 μl,体积过小将会降低回收效率。

● 洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH值低于7.0会降低洗脱效率

6 DNA产物-20℃保存。

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