试验前请仔细阅读说明书，本产品仅供科研实验使用。
1. 所购产品均质量保证！
2. 试剂盒方面提供技术指导，Elisa试剂盒还可以提供代检测服务。
3.本公司出售的任何产品均保质保量，除以下情况，客户可联系我公司申请退换货售后服务
以下情况不予办理退换货：
1、已超过受理期限的产品，如过保质期。
2、由于客户自身操作原因导致实验失败。
3、由于客户没有仔细确认要订购的指标，导致自己的指标定错。
4、产品已使用（质量问题除外）。
【主要功能】
基孔肯雅IgM抗体ELISA检测试剂盒主要用于定性检测人血清和血浆中抗基孔肯雅病毒的IgM抗体。
【产品说明】
基孔肯雅热IgM检测试剂盒 说明书 【预期用途】 基孔肯雅IgM抗体ELISA检测试剂盒主要用于定性检测人血清和血浆中抗基孔肯雅病毒的IgM抗体。 【实验原理】 此试剂盒基于ELISA技术。包被板中包被了抗人IgM抗体，如果人血清或血浆中含有IgM时，则会与其特异性结合，洗板将未结合的物质洗去， 然后加入基孔肯雅抗原溶液，洗板洗去未结合的物质，然后加入链霉亲和素和基孔肯雅抗体酶联物。洗板后，加入TMB底物液，颜色变成蓝色，加入终止液终止反 应，颜色由蓝色转为黄色，*后用酶标仪在450nm处读数。 【试剂组成】 包被板：12×8可拆卸，包被了抗人IgM抗体，密封在可重封铝箔袋中 基孔肯雅溶液1：1瓶包含6mL的基孔肯雅抗原溶液，即用，白盖 基孔肯雅溶液2：1瓶包含6mL的生物素化的基孔肯雅抗体，即用，蓝色，白盖 基孔肯雅IgM阳性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，红盖 基孔肯雅IgM临界质控：1瓶， 2mL，黄色，即用，绿盖 基孔肯雅IgM阴性质控：1瓶，1.5mL，黄色，即用，蓝盖 样本稀释液： 1瓶包含100mL的即用缓冲液，用于稀释样本，pH7.2±0.2，黄色，白盖 洗涤液：1瓶，包含50mL 20倍浓缩的缓冲液，（pH7.2±0.2）用于洗板，白盖 链霉亲和素结合液：1瓶包含6mL过氧化物酶结合的链霉亲和素，即用，红色，黑盖 TMB底物液：1瓶包含15mL TMB，即用，黄盖 终止液：1瓶包含15mL，即用，内含硫酸，0.2mol/l，红盖 【需要的设备和材料】 固定板 封板片 酶标仪（450/620nm） 37℃孵箱 洗瓶或自动洗板机 10~1000μL的移液器 漩涡混匀器 蒸馏水或去离子水 一次性试管 计时器 【储存和稳定性】 试剂在**期内，储存于2-8℃稳定 【试剂准备】 洗涤液的准备 用双蒸水稀释洗涤液，例子：10ml洗涤液+190ml双蒸水。稀释好的洗涤液在室温下5天内**。 【样本的采集和准备】 这个实验中使用的样本是人血清和血浆，如果实验在样本采集后的5天内进行，则需要储存在2-8℃，否则，必须于-20℃到-70℃深度冻存。如果样本是深度冻存的，在使用前，则需要充分混匀，避免反复冻融。 不推荐使用热灭活的样本 【样本的稀释】 将10μL样本跟1ml的样本稀释液混匀，并用漩涡混匀器充分混匀。 【实验步骤】 在开始试验前，请仔细阅读试验说明。结果的可信度是依赖于严格地按照实验说明来进行的，铺板时*少留1个孔为空白对照（A1）1个阴性质控孔（B1）2个临界质控孔（C1+D1）1个阳性质控孔（E1）。开始试验前，请将所有试剂都平衡到室温 1. 吸取50μL的质控品和稀释过的样本到相应的孔中，留A1孔做空白对照孔 2. 封板 3. 在37±1℃下孵育1小时±5分钟 4. 当孵育完成时，揭去封板片，弃去反应液，每孔300μL洗涤液，洗板3次，避免溢出。每孔浸泡的时间都必须＞5秒，*后拍板将残留的液滴都拍去。 5. 吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白对照孔的每个孔中，盖板 6. 在室温孵育30分钟 7. 重复步骤4 8. 将基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素结合物混匀10分钟 9. 吸取50μL基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素的复合物到除了空白对照孔的每个孔中，盖板。 10. 室温孵育30分钟 11. 重复步骤4 12. 吸取100μL TMB底物液到每个孔中 13. 避光孵育15分钟（**） 14. 加入100μL终止液到每个孔中，与加TMB底物液时的间隔和顺序都必须一样 15. 用酶标仪在加入终止液后30分钟内与450/620nm处检测 【检测】 调整酶标仪，以空白对照孔调零，以450nm处检测所有孔的吸光度值。 【结果】 1. 检测生效的条件 只有以下条件符合，检测的结果才能认为的**的 空白对照孔 吸光度值＜0.100 阴性质控孔 吸光度值＜临界质控 临界质控孔 吸光度值0.150-1.300 阳性质控孔 吸光度值＞临界质控 如果以上条件不符合的，那么试验结果则是无效的，需要重新检测 2. 结果的计算 临界质控平均吸光度值的计算，例子：吸光度1：0.39；吸光度2：0.37 （0.39+0.37）/2=0.38 平均吸光度值为0.38 3. 结果的说明 样本如果是比临界值高出10%，则认定为阳性， 样本如果是在临界值上下10%之内，则认定为灰色区（推荐在2-4周之后再次检测新鲜的样本，如果样本仍然是灰色区，可以直接认为是阴性） 样本如果是比临界值低出10%，则认定为阴性 4. 结果的单位 病人样本平均吸光度值×10 = U 临界值 例子： 1.216×10 =32U 0.38 临界值： 10 U 灰色区：9-11 U 阴性： ＜9 U 阳性： ＞11 U
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