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羟脯氨酸(Hyp)测定试剂盒(碱水解法)(测动物血清、组织、尿液)

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 羟脯氨酸在胶原蛋白中占13.4%,在弹性蛋白中占极少量,其它蛋白中均不存在。而胶原蛋白大多分布在皮肤、腱、软骨、血管等处,因此羟脯氨酸的量能 反映结缔组织疾病的胶原代谢情况。有人把皮肤中羟脯氨酸的测定作为筛选抗衰老药物的一个指标。在发育阶段随年龄的增长,其羟脯氨酸在尿中排泄增加,而发育 停止后稳定。老年人的羟脯氨酸比年轻人要少。鼠患有自发性高血压及继发性高血压时,尿中羟脯氨酸含量增加。手术创伤会导致尿羟脯氨酸排泄量的增加,因高 脂、低蛋白、酒精中毒及毒物、营养不良,或肝细胞变性坏死,通过炎症使纤维增加,分割肝小叶,导致肝硬化。肝纤维化时,肝内主要增加的成分为胶原纤维,羟 脯氨酸为胶原纤维所特有,测定肝羟脯氨酸的含量,可换算成肝胶原蛋白的含量,以反映肝纤维化程度。胶原纤维分解主要依赖胶原酶和其它蛋白酶的作用,其分解 产物羟脯氨酸从尿中排出,测定尿羟脯氨酸的含量,可反应胶原降解的情况。通过测定组织及尿中羟脯氨酸的含量,一方面可以判断纤维化程度,同时可以筛选预防 与治疗的药物。

产品优点如下:
1、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
2、再现性好:变异系数CV=2.1%。
3、回收试验: X =102%。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
5、测试面广:可测动物血清(浆)、组织    、尿液以及各种水产等,效果均佳。

所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为550nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为60℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器

样本收集与前处理:
尿液、血清(浆):可直接测定。
动物组织样本:可直接准确称取组织重量加碱水解液进行水解。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。

操作流程:
1、准确称取组织或直接取血清、尿液样本
2、调PH至中性:按说明书进行调PH,最后定容至10 ml,加活性碳离心取上清待测
3、取上清1 ml加R1静置10分钟加R2静置5分钟,加R3,60℃水浴15分钟
4、3500转/分离心10分钟,取上清550nm波长,1cm光径,比色

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