试验前请仔细阅读说明书，本产品仅供科研实验使用。
1. 所购产品均质量保证！
2. 试剂盒方面提供技术指导，Elisa试剂盒还可以提供代检测服务。
3.本公司出售的任何产品均保质保量，除以下情况，客户可联系我公司申请退换货售后服务
以下情况不予办理退换货：
1、已超过受理期限的产品，如过保质期。
2、由于客户自身操作原因导致实验失败。
3、由于客户没有仔细确认要订购的指标，导致自己的指标定错。
4、产品已使用（质量问题除外）。
一、产品简介：
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交联或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏， 与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。生物体内的分子氧可以经过单电子还原转变为超氧阴离子自由基(O2-)，O2-既可以直接作用于蛋白质和核酸等大分子，也可以衍生为羟自由基、单线态氧、过氧化氢及脂质过氧物自由基等对细胞结构和功能具有破坏作用的活性氧。
雅吉生物超氧阴离子自由基检测试剂盒(磺胺微板法)又称超氧阴离子产生速率检测试剂盒，其检测原理是在酸性条件下，2 份O2-与羟胺反应生成 1 份 NO2-，NO2-在对氨基苯磺酸和萘胺的作用下反应生成粉红色的偶氮物质，以酶标仪测定 530nm 处吸光度，在一定范围内颜色深浅与 O2-成正比，根据 A530 及 NO2-和 O2-的相关反应中物质的量的关系，可算出样品中O2-的浓度。该试剂盒主要用于测定植物组织中的超氧阴离子自由基含量或超氧阴离子的产生速率及清除能力。
该试剂盒仅用于科研领域，不用于临床诊断或其他用途。
二、产品组成：
| 名称规格 | 50T | 存储 |
| 试剂(A): NO2-标准(1mM) | 1ml | 4℃ |
| 试剂(B): O2- Lysis buffer | 125ml | 4℃ |
| 试剂(C): 羟胺溶液 | 30ml | 4℃ |
| 试剂(D): 氨基苯磺酸显色液 | 30ml | 4℃ 避 光 |
| 试剂(E): 萘胺显色液 | 30ml | 4℃ 避 光 |
| 使用说明书 | 一份 | |
三、自备材料：
1、蒸馏水
2、实验材料：植物组织(大豆、绿豆、玉米等叶片)、血液、组织样本等
3、研钵或匀浆器
4、离心管或试管
5、低温离心机
6、恒温箱或水浴锅
7、分光光度计，比色杯
四、操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①植物样品：取正常的新鲜植物组织，清洗干净，擦干，切碎，迅速称取 1~1.5g， 加入 2ml 预冷的O2- Lysis buffer 后冰浴条件下匀浆或研磨，4℃ 10000g 离心10min，上清液即为超氧阴离子自由基提取液，4℃保存备用。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，4℃保存，用于超氧阴离子自由基的检测。
③高活性样品：如果样品中含有较高浓度的超氧阴离子自由基，可以使用 O2- Lysis buffer 进行恰当的稀释。
2、配制系列 NO2-标准溶液：取出 NO2-标准(1mM)恢复至室温后，以 NO2-标准(1mM) 按下表继续稀释：
| 加入物(ml) | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
| NO2-标准(1mM) | 0.01 | 0.02 | 0.03 | 0.04 | 0.05 | 0.06 |
| 蒸馏水 | 0.99 | 0.98 | 0.97 | 0.96 | 0.95 | 0.94 |
| NO2-含量(μM) | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
3、O2-加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的超氧阴离子自由基浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行孔。
| 加入物(ml) | 空白孔 | 标准孔 | 测定孔 |
| 蒸馏水 | 1 | — | — |
| 系列 NO2-标准(1~6 号) | — | 1 | — |
| 待测样品 | — | — | 0.25 |
| O2- Lysis buffer | — | — | 0.25 |
| 羟胺溶液 | — | — | 0.5 |
| 混匀，25℃水浴孵育 20min。 | |||
| 氨基苯磺酸显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 萘胺显色液 | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| 混匀，30℃水浴孵育 30min。 | |||
4、O2-测定：以空白调零，比色杯光径1cm、分光光度计测定标准管、测定管530nm 处吸光度(即为A标准、A测定)。
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