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植物总酚(TP)试剂盒

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    意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域

测定原理

碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,即可得样品总酚含量。

自备实验用品及仪器

天平、烘箱、粉碎仪、筛子、超声破碎仪、60%乙醇、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、蒸馏水。

试剂组成和配制

提取液:60%乙醇,自备。

试剂一:液体6mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。

总酚提取

将样本烘干至恒重,粉碎,过40目筛之后,称取约0.1g,加入2.5mL提取液,60℃振荡提取2h10000g25℃,离心10min,取上清,用提取液定容至2.5mL,待测。

测定操作表

 

 

对照管

测定管

样本待测液µL

50

50

试剂一µL

 

250

混匀,25静置2min

试剂二µL

250

250

H2OµL

700

450

混匀,25静置10 min,对照管调零,1mL比色皿,测定A760

 

总酚含量计算公式

标准曲线:y = 5.615x+0.0012R2 = 0.9994

总酚含量(mg/g 干重)=A760-0.0012÷5.615×V÷(V÷V样总×W)

 = 0.445×A760 0.0012 ÷W

V样总:加入提取液体积,2.5mLV样:反应中样品体积,0.05mL W:样品质量,g

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