pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc

英文名称：pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc
产品类别：科研试剂
产品编号：YS2947
CAS号：YS2947
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pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端带有Myc标签(EQKLISEEDL)的新冠病毒(SARS-CoV-2)包膜(Envelop，E)蛋白，可以使用抗Myc标签的抗体来识别E蛋白的表达，或进行免疫共沉淀分析等。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达，质粒卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

E蛋白是SARS-CoV-2冠状病毒最小的结构蛋白，仅由75个氨基酸残基组成，主要分布于病毒包膜上。冠状病毒E蛋白包含可以形成同源五聚体的α-螺旋跨膜结构域(transmembrane domain)。该同源五聚体形成的离子通道(Ion channels)对离子的选择性较差。E蛋白参与病毒的组装和释放并与病毒的致病性有关，它与M蛋白的相互作用对病毒出芽过程起重要作用。

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
E protein	677-901
Myc-tag	902-931
Multiple cloning site	935-1001
T7 promoter and T7 primer binding site	1044-1065
SV40 polyA signal	1077-1460
f1 origin of ss-DNA replication	1598-1902
bla promoter	1927-2051
SV40 promoter	2071-2409
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2444-3235
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3236-3694
pUC origin	3823-4490

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒(4542bp)的图谱如下：

pcDNA3.1-SARS-CoV-2-E-Myc的多克隆位点的详细图谱见说明书：

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括：

AclI	AflII	AhdI	AleI	AscI	AsiSI	BaeI
BbsI	BbvCI	BcgI	BlpI	BmgBI	Bpu10I	BsgI
BsiWI	BsmBI	BspEI	BspQI	BsrGI	BssHII	BstEII
BstXI	BstZ17I	EcoNI	Esp3I	FseI	NotI	NruI
PflMI	PmeI	PmlI	PpuMI	PshAI	PspXI	SacII
SapI	SbfI	ScaI	SgrAI	SmaI	SrfI	SwaI
TspMI	XcmI	XmaI	XmnI

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc)包括：

AccI	GT`MK,AC	966	KasI	G`GCGC,C	2571
AfeI	AGC\|GCT	660	MfeI	C`AATT,G	1324
AgeI	A`CCGG,T	664	MluI	A`CGCG,T	1460
ApaI	G,GGCC`C	999	MscI	TGG\|CCA	2654
ApaLI	G`TGCA,C	4176	NarI	GG`CG,CC	2572
AvaI	C`YCGR,G	977	NdeI	CA`TA,TG	240
BamHI	G`GATC,C	935	NheI	G`CTAG,C	597
BclI	T`GATC,A	1231	PaeR7I	C`TCGA,G	977
BglII	A`GATC,T	971	PciI	A`CATG,T	4490
BmtI	G,CTAG`C	601	PflFI	GACN`N,NGTC	2690
BsaI	GGTCTCN`NNNN,	3561	PluTI	G,GCGC`C	2575
BsaXI	,NNN`(N)₉AC(N)₅CTCC(N)₇,NNN`	1624	PspOMI	G`GGCC,C	995
BseRI	GAGGAG(N)8,NN`	2390	PstI	C,TGCA`G	951
BsoBI	C`YCGR,G	977	PvuI	CG,AT`CG	1077
BspDI	AT`CG,AT	2412	RsrII	CG`GWC,CG	3088
BsrDI	GCAATG,NN`	2805	SacI	G,AGCT`C	655
BstBI	TT`CG,AA	3254	SalI	G`TCGA,C	965
BtsI	GCAGTG,NN`	1413	SfiI	GGCCN,NNN`NGGCC	2347
ClaI	AT`CG,AT	2412	SfoI	GGC\|GCC	2573
CspCI	,NN`(N)₁₁CAA(N)₅GTGG(N)₁₀,NN`	382	SnaBI	TAC\|GTA	346
DraIII	CAC,NNN`GTG	1690	SpeI	A`CTAG,T	989
EagI	C`GGCC,G	2478	StuI	AGG\|CCT	2393
Eco53kI	GAG\|CTC	653	Tth111I	GACN`N,NGTC	2690
EcoRV	GAT\|ATC	961	XhoI	C`TCGA,G	977
HindIII	A`AGCT,T	941

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc质粒中推荐使用的测序引物序列如下：

T3 primer (620-639): 5'-AATTAACCCTCACTAAAGGG-3'

T7 primer(1044-1065): 5'-GTAATACGACTCACTATAGGGC- 3'

pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc的全序列信息: D2947 pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc序列.txt。

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
D2947-1μg	pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc	1μg
D2947-100μg	pCMV-SARS-CoV-2-E-Myc	100μg
—	说明书	1份

保存条件：

-20℃保存。

注意事项：

本质粒未经书面许可不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1. 首次使用1μg包装的本产品时，请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 100μg包装的本产品质粒浓度为0.1μg/μl，共1ml。可以直接用于酶切或者转染细胞。