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超级核酸酶(≥99%) Super Nuclease, ≥99%)是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶，可在非常宽泛的条件下降解单链、双链、线状、环状、天然或变性等各种形式的DNA或RNA，产生长度为3至5个碱基的5'-单磷酸寡核苷酸。本产品用途广泛，常用于重组蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，以及有效降低细胞、组织、微生物等蛋白裂解液样品的粘度等。
本产品为超纯级，纯度≥99%，无蛋白酶活性，内毒素极低，<0.25EU/KU。
超级核酸酶，又称全能核酸酶或广谱核酸酶，与Benzonase endonuclease、TurboNuclease等类似酶的氨基酸序列基本一致(主要是蛋白的氨基端或羧基端所带的标签或残留氨基酸序列略有不同)，具有同样的酶催化活性和相同的用途，大多数情况下可以相互替代。具体使用时，需要注意纯度和内毒素水平对于后续分析检测的影响。
超级核酸酶的稳定性非常好。37℃保存3-5周，超级核酸酶能保持>90%的酶活性，在25℃保存10周后，酶活性基本没有变化。
超级核酸酶采用PerfectProtein™技术平台表达、纯化，表达纯化获得的重组蛋白与Serratia marcescens中的天然核酸内切酶氨基酸序列完全一致，没有额外的标签，没有额外的氨基酸，与天然粘质沙雷氏菌的核酸内切酶相比在生化特性方面相同。和本产品相似的带有His tag的为超级核酸酶(≥99%, with His-tag) (D7126)单独有售。本产品的基本信息如下表：
| 蛋白信息(About this protein) | |
| 名称(Name) | 超级核酸酶 |
| 别名(Synonyms) | 全能核酸酶，广谱核酸酶，活性核酸酶，Benzonase Nuclease，Benzonase Endonuclease，TurboNuclease，Universal Nuclease |
| CAS号(CAS No.) | 9025-65-4 |
| 分子量(MW) | ~26.7kDa |
| 外观(Physical appearance) | 液体 |
| 活性(Biological activity) | 250U/μl |
| 活力单位(Unit definition) | One unit of Super Nuclease is defined as the amount of enzyme that causes a ∆A260 of 1.0 (equivalent to the complete digestion of 37μg DNA) in 30min. |
| 纯度(Purity) | ≥ 99% by SDS-PAGE, protease-free |
| 配方(Formulation) | 10mM Tris (pH7.4), 500mM NaCl, 2mM MgCl2, 50% glycerol |
| 内毒(Endotoxin) | <0.25EU/KU by LAL |
| 产品用途(Applications) | 有效去除重组蛋白中的核酸；有效去除病毒疫苗和普通重组病毒中的核酸，使其符合FDA指南中核酸污染的要求；实时定量PCR测定重组病毒滴度时去除病毒包装细胞的核酸和包装质粒；降低细菌或细胞裂解液由核酸导致的粘度使其易于后续操作；防止细胞成团；提高包涵体蛋白(inclusion bodies)复性率；在二维凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)的过程中，提高蛋白质的分离效率和双向电泳的分辨率。 |
本产品内毒素极低。本产品经去内毒素处理，经鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate, LAL)比色法检测内毒素含量<0.25EU/KU。
本产品适用范围宽。超级核酸酶需1-2mM Mg2+作为辅助因子促进其酶活性，最适范围(Optimal Range, Enzyme Activity >90%)和有效范围(Effective Range, Enzyme Activity >15%)见下表。
| Condition | Optimal Range | Effective Range |
| Mg2+ | 1-2mM | 1-10mM |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0-10.0 |
| Temperature | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT | 0-100mM | >100mM |
| 2-Mercaptoethanol | 0-100mM | >100mM |
| Na+, K+, NH4+ | 0-20mM | 0-150mM |
| PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
| Triton X-100 | / | <0.4% |
| Sodium deoxycholate | / | <0.4% |
| SDS | / | <0.05% |
| Urea | / | <5M |
| (NH4)2SO4 | / | <100mM |
本产品活性好，效果佳。超级核酸酶与国外同类产品Competitor M对质粒DNA的消化效果参考图1。 如图所示，本产品与Competitor M相比，效果基本一致甚至略好。
图1.超级核酸酶(≥99%)消化质粒DNA的效果图。在50μl反应体系(10mM Tris pH8.0, 2mM MgCl2)中，加入5μg质粒DNA，及相应量的本产品或Competitor M，37℃孵育30min，反应完毕后立即置于冰浴，并加入1μl 0.5M EDTA以终止反应。取出10μl反应产物，加入2μl DNA上样缓冲液(6X) (D0071)，在1%琼脂糖凝胶中电泳检测。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本产品可有效降低细胞或细菌裂解液粘度。超级核酸酶有效降低哺乳动物细胞或细菌裂解液粘度的效果图参考图2。
图2.超级核酸酶(≥99%)降低细胞或细菌裂解液粘度的效果图。A. HEK293细胞经RIPA裂解液(强) (P0013B)裂解后，未加超级核酸酶的样品因大量基因组DNA释放成粘稠状，而经过终浓度25和250U/ml室温处理15min的样品不粘稠；B. 按照每克E.coli BL21(DE3)湿菌加入5ml RIPA裂解液(P0013B)的比例设置4组样品，分别加入相应量的本产品，室温处理30min，低速(350g×g)离心3min，未经超级核酸酶处理的样品因粘稠物质较多导致大量细菌碎片悬浮在管中，加入超级核酸酶的样品随着超级核酸酶量的增加，粘度逐渐降低，上清逐渐增多且澄清；C. 取B中10μl上清在1%琼脂糖凝胶中电泳检测，加入超级核酸酶样品的基因组DNA被降解为小片段。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
在最适反应条件下，超级核酸酶对于不同样品的推荐用量和处理时间请参考下表。注：实际用量和处理时间需根据样品的实际情况进行一定的摸索，若使用的溶液较为特殊，如为高盐溶液，或偏酸性、偏碱性，或含有较高浓度的去垢剂、变性剂等，应适当增加超级核酸酶的用量或孵育时间。
| 实验类型 | 蛋白样品制备 | 非药物蛋白生产 | 药物蛋白生产 | 疫苗、病毒生产 | 细胞药物 |
| 推荐产品 | (with His-tag) | ||||
| 细胞或样品数量 | 1×108个细胞 (1ml裂解液) | 1g湿重 (重悬液5ml) | 1L发酵上清液 | 1L培养物 | |
| 最低终浓度 | 2.5U/ml | 2.5U/ml | 2.5U/ml | 0.1U/ml | 0.1U/ml |
| 推荐终浓度 | 25-250U/ml | 25-250U/ml | 25-250U/ml | 5-25U/ml | 1-5U/ml |
| 处理时间 | 5~60min (37℃)或30~120min (25℃) | ||||
包装清单：
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D7121-5KU | 超级核酸酶(≥99%) | 250U/μl×20μl |
| D7121-25KU | 超级核酸酶(≥99%) | 250U/μl×100μl |
| D7121-100KU | 超级核酸酶(≥99%) | 250U/μl×400μl |
| D7121-500KU | 超级核酸酶(≥99%) | 250U/μl×2ml |
| D7121-2000KU | 超级核酸酶(≥99%) | 250U/μl×2ml×4 |
| － | 说明书 | 1份 |
保存条件：
-20℃保存，三年有效。4℃保存，至少两个月内有效。
注意事项：
本产品不建议-80℃保存，冻融可能会降低本产品的酶活性。
Mg2+是超级核酸酶的关键催化辅助因子，反应缓冲液含有1-2mM Mg2+对超级核酸酶的活性是必须的。
参照最适范围和有效范围表格，若使用的溶液较为特殊，如为高盐溶液，或偏酸性、偏碱性，或含有较高浓度的去垢剂、变性剂等，应适当增加超级核酸酶的用量或孵育时间。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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