1，如外包装严重破损泄露，请提供带日期的外观照片，其中标签及破损处清晰照，经公司同意后可以补发。
2，仅接受客户收到货物后3日内的售后申请。
订购货号：DCRS-A
MagLive 死细胞去除试剂盒
MagLive Dead Cell Removal Kit
保存：室温。（开封后可以 2-8°C 保存） 规格：10 Tests / 25 Tests
简介：
MagLive 死细胞去除试剂盒通过负选择的磁性分离方法去除细胞培养过程中的死细胞和细胞碎片。MagLive 可以去除死细胞、细胞碎片、游离的寡核苷酸。通过这样的步骤后可以提高细胞培养的纯度，改善数据分析的质量，并对后续下游的实验结果产生积极的影响，对将来的分子生物学的细胞分析更为有效。MagLive 产品不含外源蛋白，如 Annexin-V（膜联蛋白 V）。
MagLive 特点：
² 不含 Annexin-V
² 不含外源蛋白，不会污染
² 无菌溶液
² 一步去除死细胞、细胞碎片、游离寡核苷酸
² 不需要含钙（Annexin-V 需要）的缓冲液
² 对于悬浮细胞尤其适用
² 和台盼蓝或 PI 死细胞检测方法兼容
提供的实验材料：
MagLive 死细胞去除溶液：10T (1 mL) / 25T (2.5 mL)
其他未提供的所需实验材料：
1. 5ml 无菌培养管/试管
2. 15ml 无菌离心管
3. 离心机
4. 磁性分离器（磁力应足够大，否则纳米级磁珠不容易被分离）
5. 移液器及吸头
6. 无菌 PBS
7. 台盼蓝/细胞计数器等细胞计数相关耗材
实验步骤：
1. 收集不超过 5mL 的浓度为 1×105～1×106/mL 的悬浮细胞溶液至 5mL 的无菌聚苯乙烯培养管
/试管中并计数。
2. 对细胞悬浮液 300g 离心 5min。去除上清液，用 1mL 无菌 PBS 重悬。
注意：不同于 Annexin V 的细胞分离方法，本产品不需含 Ca2+缓冲液。
但我们建议对细胞悬液进行血清饥饿处理，因为血清会影响分离效果。而且培养基中游离的蛋白也会影响分离效果，因为游离的蛋白和死细胞会竞争与磁珠的结合。我们建议采用无蛋白培养基。
3. 对重悬后的溶液加入 0.1mL MagLive。使用移液器吸头进行轻柔吹吸两次，以使溶液完全混匀。室温孵育 5min。
注意：磁性分离的时间不能太长，否则活细胞会沉降，反而降低活细胞率。
4. 将试管放置在磁性分离器环境中 15min。本溶液中的死细胞、细胞碎片、游离的寡核苷酸等会被磁珠捕获并吸附至磁铁一侧。应使试管和磁铁的距离越小越好。
说明：如果实验室没有磁性分离器，可使用更经济的磁铁代替。但其磁力应足够分离纳米级磁珠。可以先采用常见细胞预实验，如 NIH3T3。
5. 保持试管不动。另取 1 支 15mL 无菌离心管。使用移液器吸头轻柔的吸取细胞悬液（约 1mL） 转移至新的 15mL 离心管中。注意不要吸取到磁珠层（参考注意事项 4）。
6. 吸取 9mL 无菌 PBS 缓冲液至 15mL 离心管。轻柔混匀，300g 离心 5min。去除上清液。
7. 使用细胞培养液将离心后的细胞进行重悬。即可以进行后续的实验了。
以上实验数据为经验数据，亦可自行优化。以上过程应保持在无菌条件下进行。
常见问题：
1. 细胞非悬浮状态而是成团状态，是否可以使用 MagLive 死细胞去除试剂盒？
答：可以。需要先对成团细胞进行消化解离。推荐使用 Mildase 细胞消化液产品（订购货号：
HC0145）或 FCMase 细胞消化液（订购货号：HC0146）。
2. 对需要去除的悬浮溶液中细胞的浓度是否有要求？
答：有要求。如果细胞浓度过高会影响并降低死细胞的去除效率。因此，我们推荐细胞的浓度为 1×105～1×106/mL，最高不要超过 1×107/mL。
3. 磁性分离后溶液的颜色依然是棕色的而非无色透明是什么原因？
答：本试剂的原理是磁珠分离，但未结合目标死细胞的磁珠是不容易被磁吸的，所以一定时间内溶液颜色并不会完全无色。未吸附的磁珠后续会被清洗掉（实验步骤 6）。
注意事项：
1. 如将 MagLive 放置在 4C 环境，应待平衡至室温后再使用。且应在开盖前漩涡或超声混匀。
2. 建议先采用常见细胞预实验，如 NIH3T3，一是熟悉该实验过程，二是验证实验所需其他材料可以满足本实验要求，如磁性分离器的磁力足够大。
3. 如果活细胞率太低，仅使用 MagLive 可能不能达到一次去除所有细胞碎片或死细胞的目的。此情况下，建议结合使用其他方法，或多次操作，或适当增加磁珠的用量。
4. 对于较难存活的细胞，如不能耐受 PBS 的环境，建议采用其他方法。
5. 结合死细胞等的磁珠被磁性分离后肉眼是看不到细胞层的，所以在吸取活细胞悬液的时候要小心，不能搅动到磁性一侧吸附的细胞层。
6. 未吸附到死细胞等的磁珠是不容易被磁性分离的，所以在后期细胞的洗涤过程中一定要把游离的磁珠洗去（实验步骤 6）。
7. 磁性分离器需要具备分离纳米级磁珠的磁力。每次处理的溶液量不宜过多，当试管直径较大时，部分溶液不容易被分离。会影响分离效果。应使试管离磁性分离器越近越好。
8. 细胞悬浮缓冲液不能含有蛋白。否则会降低磁珠结合死细胞等的能力，因为游离的蛋白和死细胞会竞争与磁珠的结合。
相关产品：
| 货号 | 名称 | 规格 | 特点 |
| HC0058 | PBS，1×，pH7.2-7.4，杜贝 尔科磷酸盐缓冲液 | 500ml | 细胞培养级，不含钙镁 |
| HC0736 | 10×PBS缓 冲 液 （ pH 7.2-7.4），无菌溶液，D-PBS | 500ml | 细胞培养级，不含钙镁 |
| HC0149 | PBS + 2% FBS（胎牛血清） | 500ml | 细胞冲洗 |
| HC0153 | 流式用鞘液，8x | 2.5L | 流式平台专用鞘液，8 倍无菌浓缩液，节约运 输成本 |
| HC0145 | Mildase 细胞消化液 | 100ml | 温和无毒，替代胰酶对贴壁细胞的消化，不含 动物酶，无需灭活 |
| HC0146 | FCMase 细胞消化液 | 100ml | 流式细胞术、细胞计数等用细胞消化液，比 Mildase 的消化能力强，可以用于替代胰酶对组织等进行温和消化。 |
注意：以上产品仅供科学研究，不用于临床诊断或药物开发。
V3.1
我要询价
*联系方式：
(可以是QQ、MSN、电子邮箱、电话等，您的联系方式不会被公开)
*内容：
