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肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)

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肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)

 

产品简介:

肌酐(creatinine,Cr)是人体或动物肌肉内代谢的产物,每20g肌肉代谢可产生约1mg肌酐,由肾小球滤过排出体外,外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物,内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。

雅吉生物肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)检测原理是肌酐与苦味酸盐发生Jaffe反应,生成橘红色的苦味酸肌酐复合物,该复合物生成量与肌酐含量呈正比,通过酶标仪测定510nm处吸光度,可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液样品中肌酐含量。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。

 产品组成:

名称

100T

Storage

试剂(A):肌酐标准(10mmol/L)

1ml

4℃避光

试剂(B):肌酐标准稀释液

10ml

RT

试剂(C):蛋白淀液

5.5ml

RT避光

试剂(D):Cr显色液

50ml

RT避光

试剂(E): Cr Assay Buffer

5.5ml

RT

 自备材料:

11.5ml离心管、96孔板

2、离心机、酶标仪

3、蒸馏水

操作步骤(仅供参考)

1、准备样品:血浆、血清按照常规方法制备,-20°℃冻存。取血清或血浆0.05ml,加入蛋白沉淀液0.45ml,充分混匀,静置5min后3500r/min离心10min,取上清液,4°℃保存待用;尿液中肌酐含量较高,应先用蒸馏水作50~200倍稀释后再测。

2、配制标准品工作液:取肌酐标准(10mmol/L),按肌酐标准(10mmol/L):肌酐标准稀释液=1:99的比例混合,使浓度达到100μmol/L,即为标准品工作液-肌酐标准(100μmol/L);4℃保存,1周有效。

3、Cr 加样:按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的Cr浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

加入物(μl

空白孔

标准孔

测定孔

蒸馏水

150

-

-

肌酐标准(100μmol/L)

-

150

-

血清无蛋白滤液或稀释尿液

-

-

150

Cr显色液

50

50

50

Cr Assay Buffer

50

50

50

 4、Cr检测:充分混匀,室温放置15min,酶标仪检测510nm吸光度,空白孔调零,读取各孔吸光度,分别为A标准A测定

计算:

血清(浆)肌(μmol/L)=(A测定/A标准)×100

尿液肌酐(μmol/d)=(A测定/A标准)×100×N×24h 尿量(L)

式中:

A测定=测定孔的吸光度

A标准=标准孔的吸光度N=尿液稀释倍数

内生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)校正的内生肌酐清除率值(L/24h)=内生肌醉清除率值×1.73/体表面积(m2)

:以正常人24h内生肌酐清除率值为128L(即24h内有128L血液中的肌酐通过肾脏被清除)作为100%,则内生肌酐清除率(%)=校正的内生肌酊清除率值×100/128(或0.78)

单位换算:d=24h

参考区间:

健康成年男性血清肌酐

44~133μmol/L(O.5~1.5mg/dl)

健康成年女性血清肌酐

70~106μmol/L(O.8~1.2mg/dl)

健康成年男性肌酐清除率值

105±20ml/min

健康成年女性肌酐清除率值

95±20ml/min

 

注意事项:

1、测定各孔时,各孔温度均需达到室温,否则影响结果。

2、轻度溶血样本对肌酐测定无影响;尿液样品中肌酐含量较高,样品需做50~200倍稀释,如果显色后吸光度仍较高,还需将尿液继续扩大稀释倍数,重新检测。

3、呈色后标准管吸光度较稳定,但测定管吸光度随时间延长而增加;另外肌酐浓度越高,吸光度变化越快,因此加入显色剂后30min内完成检测为宜。

4、以标准品做梯度实验,200μmol/L以下浓度呈不同程度的黄色-橙黄色,超过200μmol/L颜色逐渐加深,呈橘红色,到1000μmol/L呈深橘红色;用酶标仪测定100μmol/L,吸光度值在0.3左右。

有效期:12个月有效。

 

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