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BL21 感受态细胞
BL21 Chemically Competent Cell
保存条件： -80℃
产品规格:
BL21
10×100μl
pUC19（control vector）
10pg/μl；10μl
E. coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-) gal [malB+]K-12(λS)
BL21 是最早开发的用于原核表达的菌株，BL21（DE3）、Rosetta、OrigamiB(DE3) 等一系列原核
表达菌株均来源于 BL21 菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达，不含 T7 RNA 聚合酶，所以不能用
于由 T7 启动子驱动的蛋白表达(如：pET 系列)；但含有大肠杆菌 RNA 聚合酶，可以用于 tac 或 trc 等
使用大肠杆菌 RNA 聚合酶的原核系统的表达（如：pGEX，pMAL 质粒）。 BL21 感受态细胞由特殊工
艺制作，经 pUC19 质粒检测转化效率达 107cfu/μg。
1. 取 100μl 冰上融化的 BL21 感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。
2. 42℃水浴热激 90 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分
钟。
4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT
基 因 型
简 要 说 明
操 作 说 明或 LB 培养基上。
5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。
1. 感受态细胞最好在冰上融化。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 诱导时，IPTG 浓度可选（0.1-2mM 均可）。
5. 为获得需要量的蛋白，最佳诱导时间，温度，IPTG 浓度需实验者优化。
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