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Equi-phi29 DNA聚合酶

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Equi-phi29 DNA Polymerase是phi29的改造体,并经多次纯化分离而得。在保留了phi29 DNA聚合酶的链置换、连续合成特性(>70kb)的基础上,提高了滚环扩增的反应温度,该酶酶可以在42℃条件下持续的进行DNA合成(而phi29 DNA 聚合酶在此温度下反应活性很低)。
这种高温的反应特性,在以下几个方面对实验有明显的提升:

(1)在NGS测序中,其提升了高GC含量、回文结构等复杂模板的延伸能力,使得NGS的覆盖度更均一,降低测序所需深度;

(2)高温的反应条件,提升了基因组DNA的WGA产物的合成量,并可以进行变温扩增;

(3)降低测序中Gap区域,提升单细胞测序的数据质量和完整度;

(4)降低非特异性扩增产物;

(5)提升MDA/RCA等实验的扩增性能和特异性。
此外,Equi-phi29 DNA Polymerase仍然具有很强的3’-5’外切酶校读功能,合成的DNA片段保真性高。该酶的外切酶活性较强,因此合成过程中引物需要3’端硫代修饰,以降低外切活性对引物的切割效应。

主要特征

  • 超强链置换能力
  • 连续合成能力
  • 扩增的高保真性

应用

  • DNA恒温滚环扩增
  • 需强链置换和DNA连续合成的反应
  • 质粒快速复制
  • 高保真快速复制

储存

-20℃可保存3年。

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