您好,欢迎光临上海雅吉生物商城!
工作时间:9:00-18:00
全国服务热线:021-34661276

胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒

规格
价格库存
订购热线:021-34661276
我要询价
  • 商品详情
  • 售后服务
  • 相关文献

     意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

ICDHcEC 1.1.1.42)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化异柠檬酸脱氢脱羧生成 α-酮戊二酸,同时还原NADP+生成NADPHICDHc是细胞质中除了磷酸戊糖途径外又一种NADPH重要来源,在逆境中该酶活性通常会发生显著变化。


测定原理:

利用ICDHc催化NADP+还原成NADPH反应,在340 nm下测定NADPH浓度的增加。


所需的仪器和用品:

紫外分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


试剂的组成和配制:

提取液:60mL×1瓶,4保存;

试剂一:液体50 mL×1瓶,4保存;

试剂二:粉剂×1支,4保存;

试剂:粉剂×1支,4保存

试剂:粉剂×1支,-20保存;


样本的前处理 

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g:提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。


测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

2、 将试剂二转移至试剂一中充分溶解,置于37(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中预热10min左右;用不完的试剂4℃保存。

3、 在试剂三中550μL蒸馏水充分溶解,置于37(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中预热10min左右用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融

4、 在试剂四中550μL蒸馏水充分溶解,置于37(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴中预热10min左右用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融

5、 操作表:

试剂名称μL

测定管

试剂一

750

试剂

10

试剂

10

样本 

30

将上述试剂按顺序加入1 mL石英比色皿中,加样本的同时开始计时;混匀,340nm波长下记录20s时的初始吸光度A12min20s时的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

我要询价
*联系方式:
(可以是QQ、MSN、电子邮箱、电话等,您的联系方式不会被公开)
*内容:


微信客服
扫一扫立即咨询


微信客服
扫一扫立即咨询

销售电话:

021-34661275

021-34661276

15301693058