您好,欢迎光临上海雅吉生物商城!
工作时间:9:00-18:00
全国服务热线:021-34661276

单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)试剂盒

规格
价格库存
订购热线:021-34661276
我要询价
  • 商品详情
  • 售后服务
  • 相关文献

 如需详细说明书,请联系客服

 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

 

 

测定意义:

 

MDHAR 催化 MDHA 还原生成 AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。

 

 

测定原理:

 

MDHAR 催化 NADH 还原 MDHA 生成 AsA  NAD+NADH  340 nm 有特征吸收峰,但是 NAD+没有。通过测定 340 nm 光吸收下降速率,来计算出 MDHAR 活性。

实验中所需仪器及设备:

 

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、可调式移液枪和双蒸水

 

 

试剂组成和配置:

 

试剂一:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

 

试剂二:液体 20mL×1 瓶,室温保存。

 

试剂三:粉剂×1 瓶(棕色),4℃保存。临用前加入 3 mL 蒸馏水充分溶解。

 

试剂四:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前加入 2.5 mL 蒸馏水充分溶解。

 

试剂五:液体 15μL×1 瓶,4℃保存。临用前加 3 mL 试剂二充分溶解。

 

 

粗酶液提取:

 

1. 组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL) 15~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一)进行冰浴匀浆。8000g4℃离心 10min,取上清置冰上待测。

 

2.. 细菌、真菌:按照细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~10001 的比例(建

 

 500 万细胞加入 1mL 试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);8000g 4℃离心 20min,取上清液置冰上混匀待测。

 

3. 血清等液体:直接测定。

 

 

MDHAR 测定操作:

 

1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min,调节波长到 340 nm,蒸馏水调零。

 

2. 试剂二在 25℃水浴锅中预热 30 min

 

3.依次在微量石英比色皿/96 孔板中加入 20μL 试剂三、20μL 试剂四、20μL 试剂五和 120μL 试剂二,最后加入 20μL 上清液,迅速混匀后于 340nm 比色,记录 30s  150s 的吸光值 30s

 

和 150s 的吸光值 A1  A2A=A1-A2

 

 

MDHAR 活性计算公式:

 

a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下

我要询价
*联系方式:
(可以是QQ、MSN、电子邮箱、电话等,您的联系方式不会被公开)
*内容:


微信客服
扫一扫立即咨询


微信客服
扫一扫立即咨询

销售电话:

021-34661275

021-34661276

15301693058