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植物硝态氮试剂盒

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     意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

硝态氮是植物最主要的氮源。植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

 

测定原理

在浓酸条件下,NO3-与水杨酸反应,生成硝基水杨酸,硝基水杨酸在碱性条件下(PH>12)呈黄色,在一定范围内,其颜色深浅与含量成正比,可比色测定计算得硝态氮含量

 

自备实验用品及仪器

蒸馏水、天平、常温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。

 

试剂组成和配制

试剂一:粉剂×2瓶,4℃避光保存。临用前根据用量每瓶加2mL浓硫酸充分溶解。

试剂二:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1支,4℃保存。

 

样本处理

按照质量(g):蒸馏水体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL蒸馏水)加入蒸馏水,室温匀浆后置于90℃恒温水浴锅中浸提30min,期间不断晃动或者置于90℃恒温摇床中振荡提取30min,待冷却后于25℃,12000g离心15min,取上清待测。(深色植物匀浆后加入约3mg试剂三后再提取)

 

测定操作表

 

空白管

测定管

样本(μL

 

30

蒸馏水(μL

30

 

试剂一(μL

60

60

充分混匀,25℃静置30min

试剂二(μL

1425

1425

混匀,涡旋振荡,使出现的沉淀充分溶解,取1mL1mL玻璃比色皿中测定410nm处吸光值A,△A=A测定管-A空白管

注意:空白管只需测定一次。

 

计算公式

标准曲线:y=0.0156x+0.0073R2=0.9997

NO3 N含量(mg/kg鲜重)=A-0.0073÷ 0.0156÷W÷V样总)

                =64.1×A-0.0073÷W

 

V样总:加入提取液体积,1mLW:样本质量,g

 

注意事项

1. 试剂一配制好后尽快使用,4℃可保存一周。

2. 试剂一和试剂二均具有强腐蚀性,操作时需做好防护措施。

3. 最低检出限为2μg/g

 

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