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Sau DNA 聚合酶

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Sau DNA聚合酶(Sau DNA Polymerase)是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶,主要应用于RPA重组酶扩增。重组酶UvsX与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链DNA中寻找同源序列;一旦引物定位了同源序列,就会发生链交换反应,Sau DNA聚合酶启动DNA合成,对模板上的目标区域进行指数式扩增, 被替换的DNA链与SSB结合,防止进一步替换。
Sau DNA 聚合酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) DNA 聚合酶(Sau) I 基因, 是将其N端的1-293个AA截去而得。该酶保留了DNA聚合酶 的 5´-3´ 聚合酶活性,但是缺失了 5´-3´ 和3‘-5’核酸外切酶活性,可用于重组酶扩增。

应用

  • 随机引物法标记
  • cDNA 第二条链的合成
  • 单个 dA 的加尾
  • 链置换的 DNA 合成

活性定义

在37℃条件下,30min内参入10nmol酸性不容物定义为1个活性单位。

1X Sau Reaction Buffer

50 mM NaCl ,10 mM Tris-HCl (Ph7.5) , 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT。

储存

-20℃可保存2年,避免反复冻融。

热失活

75°C,20min。
 
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