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| 9N 2.0 DNA连接酶（又名9oN DNA Ligase）能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5´-磷酸末端和3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶来源于极度耐热的海底超嗜热古菌（Thermococcus sp.）9°N 菌株中克隆的连接酶基因，在 45℃-90℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突变，使得耐受更高的温度，在90℃孵育15min仍然保留50%以上的活性，因此其适用于：（1）高温条件下，连接DNA链上的切刻位点；（2）与 PCR 反应条件兼容可用连接酶检测反应；（2）连接酶链式反应，对等位基因进行特异性检测。 | ||||||
组分 | ||||||
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应用 | ||||||
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活性定义 | ||||||
| 1 单位指 50μl 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟内能使 50% 的1μg 经 BstEII 消化的 λDNA 片段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。 | ||||||
储存 | ||||||
| -20℃可保存两年，长期储存请置于-70℃。 | ||||||
1× 9N DNA Ligase 反应缓冲液 | ||||||
| 10 mM Tris-HCl，600μM ATP，2.5 mM MgCl2，2.5 mM DTT，0.1% Triton X-100（pH 7.5 @ 25℃），45℃ 温育。 |
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