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TEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,它可特异性识别Glu-Asn- Leu-Tyr -Phe-Gln-Gly七氨基酸序列,并高特异性、高活性剪切(剪切位点在Gln-Gly之间)。TEV蛋白酶经6XHis标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(Cat.No.: C0401, HaiGene)去除。TEV酶在4℃-30℃温度、pH范围(6.0-8.5)反应条件下均具有活性(见下表)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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组分 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
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单位定义 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
在1XrTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1mM DTT),30℃反应1h,剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
应用 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
融合蛋白标签剪切去除。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
储存 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
长期储存-70℃,可储存2年,-20℃可储存6个月。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
实例 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
Fig: 重组表达的SUMO-TEV-Y融合蛋白经rTEV酶切后去除SUMO融合标签。M:Protein Marker,泳道1:纯化后的SUMO-TEV-Y蛋白; 泳道2:1μl TEV Protease 酶切1h产物;泳道3:1μl TEV Protease 酶切3h产物。 |
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