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T5核酸外切酶

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T5核酸外切酶沿5’→3’方向降解DNA,它可降解双链DNA、单链DNA和缺刻的质粒DNA。它既能从5’-末端起始降解DNA,也能从线性或环状双链DNA的切刻或缺口处起始降解DNA,但不能降解超螺旋双链DNA。基于以上特性,T5核酸外切酶可应用于Gibson组装。

单位定义

1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。

组分

名称 数量
T5 Exonuclease (10U/μl) 100μl
10×T5 Exo Buffer 1ml

储存

置于-20°C,可保存3年。

使用注意事项

(1)1× T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。该酶在PCR Buffer中也具有活性。
(2)该酶的最佳反应温度为37°C,在50°C也具有一定活性,因此可用于Gibson组装。
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