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HPV假病毒

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 HPV假病毒说明书

 

【产品名称】

通用名称:HPV假病毒 

【包装规格】

15μl /30μl /50μl /100μl/

【预期用途】

用于HPV抗血清或者单抗中和抗体滴度体外检测。

【检验原理】

中和抗体在体外与假病毒中和,使得部分假病毒丧失感染细胞的能力,进入细胞的假病毒会表达eGFPRFPE2-Crimson荧光报告基因蛋白通过Elispot读板仪扫描并计数每孔荧光斑点数,待测样品荧光斑点数与假病毒对照组荧光斑点数进行比较,计算待测样品的抑制百分比通过计算公式可以计算出当50%假病毒被抑制时抗体的稀释倍数,ID50Inhibition dilution),ID50来表示抗体对假病毒中和活性ID50越大,抗体中和活性越高。

主要组成成分

HPV假病毒颗粒,L1蛋白报告基因

储存条件及有效期

-80 密封贮存。有效期:长期。

避免反复冻融。

生产日期及有效期详见标签。

【样本要求】

样本为HPV假病毒,需在无菌条件下操作。

使用方法

1. 提前预铺细胞:中和实验所细胞为HEK 293FT细胞暂无其他推荐的替代细胞)提前2-6小时将HEK 293FT细胞消化,并加入96透明平底无菌细胞培养板中。

2. 待测样品系列稀释:96无菌细胞培养板中将待测样品进行系列稀释。

3. 病毒稀释:本产品为假病毒母液,客户依据报告中假病毒的滴度进行稀释使用(1TCID50=1荧光斑点)。

4. 待测样品与病毒混合孵育:将系列稀释的待测样品与稀释后的假病毒溶液混合4℃条件下孵育1小时

5. 孵育结束后,将上述混合液与提前预铺的细胞进行混合。

6. 将细胞培养板置于375% CO2二氧化碳培养箱中继续培养60-96小时。

7. 使用ELISPOT荧光斑点计数仪进行检测,计算感染抑制率(%

感染抑制率(%=1-(样本检测值-细胞对照值)/(病毒对照值-细胞对照值)×100%

8. 客户根据自定标准进行ID50计算(推荐使用Reed-Muench法)

建议的96细胞培养板布局

 

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B

 

细胞对照(仅含有细胞)

病毒对照(假病毒+细胞

 

 

 

 

 

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【阳性判断值】

1. 中和实验过程中必须设置细胞对照和病毒对照(见,建议的布局图)。

2. 中和实验过程中需要设置阴性内控及阳性内控品(客户备)来判断实验是否成立

【产品性能指标】

外观 外观应满足如下要求:包装完整,无破损,文字符号标识清晰

【注意事项】

1. 本产品仅供中和抗体体外检测使用。

2. 产品报告提供假病毒滴度。因细胞水平的中和抗体检测受细胞类型、细胞培养状态环境条件等影响较大,客户需根据自身实验室条件确定细胞量、病毒加入量等中和实验参数

3. 减少反复冻融,少量使用建议分装储存

4. 流水或者4融化使用。

5. 无菌操作。

6. 本产品不能扩增传代

 

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