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脂多糖(LPS)提取试剂盒

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 产品概述 product description

脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分,结构很复杂、热稳定性极高(在250℃下干热灭菌2h才完全灭活)。受LPS发现的历史原因,如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS由多糖链和脂质A组成,不同细菌间的多糖链是高度变化的,决定细菌的血清型;而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动,包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。 由于LPS与机体免疫机能的密切关系,生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究,如阐明LPS的结构,代谢,免疫学,生理学,毒性,生物合成途径;诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌;诱导疾病研究的动物模型如炎症反应,急性肺损伤。 PS提取试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖,提取产量高,省时,蛋白质和核酸污染低。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
细菌
产品特点
1.适用性广,能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。
2.操作简单方便。
3.提取LPS下游应用广,包括直接用于免疫刺激
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项:
1.离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
2.可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行脂多糖定量。
 
使用方法

1. 室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞
2. 加入500 μl试剂A重悬细菌,8000×g离心3分钟,弃上清。
3. 收集沉淀,加入500 μl试剂A重悬沉淀,8000×g离心3分钟,弃上清。
4. 收集沉淀,加入500 μl提取液B重悬沉淀。
5. 在150-300w超声10秒间隔10秒,超声5-15分钟。
6. 在10000×g离心10分钟取上清。
7. 在上清中加入500 μl提取液C,剧烈涡旋20秒充分混匀。
8. 在66-68℃水浴或气浴孵育30分钟。中间隔10分钟用移液器轻轻吹打混匀。
9. 置4℃静置过夜。
10. 在4℃,3000×g离心20分钟。
11. 取最上层上清至另一干净离心管,即得脂多糖样品。
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