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大鼠海绵体平滑肌细胞

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1.产品名称:大鼠海绵体平滑肌细胞

2.组织来源:海绵体组织

3.产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介:

大鼠海绵体平滑肌细胞分离自海绵体组织;海绵体,又称海绵体肌,是最硬的平滑肌和结缔组织。海绵体是一种勃起组织,外面包有坚厚的白膜,内部由结缔组织和平滑肌组成海绵状支架,其腔隙与血管相通。它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中,在消化海绵体组织时,胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系,破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。因此可用胶原酶分离出海绵体平滑肌细胞。平滑肌,是非横纹肌的肌肉组织。分布在人体动脉和静脉血管壁、膀胱、子宫、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫状肌和虹膜。平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。

5.方法简介:

大鼠海绵体平滑肌细胞采用胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。

6.质量检测:

大鼠海绵体平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
产品货号 CM-R203
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%

大鼠海绵体平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。

三、使用方法 大鼠海绵体平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈成纤维细胞样,标准操作流程下,细胞可传3-5代左右;3代以内状态最佳;建议您收到细胞后尽快进行相关实验 。 客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。

1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度 的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化 1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养 瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变 圆后,再加入5ml完全培养基终止消化; 3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5 mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养; 4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。

3. 细胞实验 因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培 养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因 没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml ),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

四、注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详 尽告知细  胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。

5. 该细胞只可用于科研。 

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