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产品概述 product description
CM-DiI细胞膜染色试剂盒是利用 M系列荧光探针进行细胞膜特异性染色的试剂盒。本试剂盒中的 DiI细胞膜染色探针为橙色荧光标记的细胞膜探针，具有549 / 565nm的最大激发/发射波长。 M系列探针是对活细胞的细胞膜进行选择性染色的一类荧光染料，该系列探针可以选择性标记细胞膜。当亲脂性的荧光探针CM-DiI进入细胞膜后，在整个细胞膜上扩散，最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。染色液CM-DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱，当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，被激发后可以发出橙色的荧光，具有很高的淬灭常数和激发态寿命。 荧光探针CM-DiI通常不会明显影响细胞的活力，因此被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂（long-term tracer）。除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP（Fluorescence Recovery After Photobleaching）检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。M系列细胞膜探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的橙色荧光探针，还可以提供红色、绿色、深红色等颜色的染色试剂盒。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。 以96孔板每孔200μl染色液计，本试剂盒小包装可以染色1000-5000个样本。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2.荧光染色剂为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
2.荧光染色剂为DMSO溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
荧光显微镜/激光共聚焦
适用样本
动物细胞
产品应用
荧光显微镜/激光共聚焦
仪器准备
1.荧光显微镜/激光共聚焦
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.CM-DiI染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6.染色后立即进行分析。
7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
2.CM-DiI染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅供参考。
6.染色后立即进行分析。
7.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
使用方法
1． 染色工作液的配制：
根据样本数量，用37℃培养箱预热的HBSS或相应的无血清培养基或其他缓冲液将 CM-DiI荧光染料进行500-1000倍稀释，配制成染色工作液。
2． 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为1×106/mL。
3) 在37 ℃孵育细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束，500×g离心5分钟。
5) 倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的培养基重悬细胞。
6) 重复（4），（5）步骤两次以上
贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片2～3次，每次用预热的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10分钟，然后吸干培养基。
3． 用荧光显微镜/共聚焦或流式细胞仪检测
激发波长为549nm，最大发射波长为565nm。
根据样本数量，用37℃培养箱预热的HBSS或相应的无血清培养基或其他缓冲液将 CM-DiI荧光染料进行500-1000倍稀释，配制成染色工作液。
2． 细胞染色
悬浮细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 加入适量体积的染色工作液重悬细胞，使其密度大约为1×106/mL。
3) 在37 ℃孵育细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 孵育结束，500×g离心5分钟。
5) 倾倒上清液，再次缓慢加入37℃预热的培养基重悬细胞。
6) 重复（4），（5）步骤两次以上
贴壁细胞染色
1) 用PBS洗涤细胞2次。
2) 细胞培养板中或细胞爬片上加入适量体积的染色工作液。
3) 37 ℃孵育细胞 5～20分钟，不同的细胞最佳培养时间不同。可以用20分钟作为起始孵育时间，之后优化体系以得到均一的标记结果。
4) 吸干染色工作液，用培养液洗培养板或盖玻片2～3次，每次用预热的培养基覆盖所有细胞，孵育5～10分钟，然后吸干培养基。
3． 用荧光显微镜/共聚焦或流式细胞仪检测
激发波长为549nm，最大发射波长为565nm。
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