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黑色素切片染色试剂盒(Dopa 法)

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 产品简介:

黑色素在黑色素母细胞内合成。黑色素母细胞起源于神经嵴,在胚胎发育过程中,由神经嵴移行到皮肤、眼和中枢神经系统。因此,在正常情况下皮肤的表皮、毛囊、眼的虹膜、睫状体、脉络膜脑的软脑膜、黑质、迷走背核,以及交感神经节和脊神经节的节细胞内均可有黑色素沉着。在病理情况下可能在全身各处含有黑色索沉着物。黑色素在显微镜下通常不呈黑色,而望黄棕色或棕褐色,其颗粒大小不一。黑色素染色可以用于黑色素的诊断,包括检测神经黑色素、假性黑变病色素等。Dopa 黑色素反应法为经过 Laidlaw 修正之 Bloch 法(1932 年)。此法要求采取新鲜组织或组织固定于 5%甲醛液(至多固定 2-3h)。用冰冻切片,为预防反应作用受影响,冰冻切片浸水时间不超过数秒钟。

本试剂盒根据 Dopa 黑色素反应法的原理开发,具有下列特点:

1. 即开即用,操作简单。
2. 本试剂盒可用于切片的显色检测。
3. 产品稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀。
4. 本产品足够染色 250 张切片。
5. 本产品只用于科研
操作步骤:
1. 临用时取 1.2ml 黑色素切片染色溶液 A 及 0.4ml 黑色素切片染色溶液 B 与5ml 黑色素切片染色溶 C 混合,即成染液。在一定的温度中,反应速度以 pH值为转移。当 pH 值为 7.4,温度 37.5℃时,则反应在 4-5h 内完成。若于配制染液时改用 1ml 黑色素切片染色溶液 B,则 pH 值为 7.7;若完全不用黑色素切片染色溶液 B,则 pH 值在 8.2,在此碱性溶液中,温度不变则反应在 1h内完成。但此加速法促成组织浓染,用缓慢反应可靠。基于上述原因,使用微量碱性的玻璃皿器亦有浓染趋势,使用微量酸性者则不发生反应。因此所用一切器皿必须没有酸碱性反应,绝对保持器皿清洁。
2. 浸切片于混合好的染液中约 30min,温度 37.5℃。
3. 更换 1 次染液(预先贮藏在冰箱中)。
4. 每 30min 镜检 1 次,2-3h 后染液变红色,3-4h 后染液变棕色,表明切片染色适宜。
5. 水洗。
6. 95%乙醇、无水乙醇脱水,二甲苯透明,封固(人工胶最好)。
7. 结果:Dopa 阳性反应细胞浆(黑素母细胞及白细胞)呈灰色至黑色,黑素不改变颜色,胶原纤维无色或成浅灰色

 

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