使用目的：
本试剂盒用于测定血清 血浆及相关液体样本中的指标含量.
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中指标水平.用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色.TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色.颜色的深浅和样品中的指标呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）,通过标准曲线计算浓度.
试剂盒组成
| 1 | 30倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 7 | 终止液 | 6ml×1瓶 |
| 2 | 酶标试剂 | 6ml×1瓶 | 8 | 标准品 | 0.5ml×1瓶 |
| 3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 9 | 标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 |
| 4 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 10 | 说明书 | 1份 |
| 5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2张 |
| 6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1个 |
操作步骤
1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可在小试管中进行稀释.
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同） 标准孔 待测样品孔.在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）.加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀.
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟.
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干.
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外.
7. 温育：操作同3.
8. 洗涤：操作同5.
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl,终止反应（此时蓝色立转黄色）.
11. 测定：以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）. 测定应在加终止液后15分钟以内进行.
文献参考：文章标题：Lactobacillus fermentum CQPC08 protects rats from lead-induced oxidative damage by regulating the Keap1/Nrf2/ARE pathway
作者列表：Xingyao Long, Fengjun Sun, Zhiying Wang, Tongji Liu, Jianjun Gong, Xuemei Kan, Yujie Zou, Xin Zhao
影响因子：5.396
发表时间：2021-5-3
DOI:10.1039/D1FO00589H
