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发布时间:2026/9/1 10:37:29 阅读次数:48
发布单位:上海雅吉生物科技有限公司
做蛋白表达的同行,大概率都经历过这种崩溃时刻: 周一满怀期待种下细胞,周三一看,别人的 293T 早已长满培养瓶,你的细胞却生长缓慢;临近交结果,看着平缓的生长曲线束手无策;好不容易完成转染,蛋白表达量极低,WB 结果几乎看不到条带.
如果你也被低表达 生长慢的问题困扰,今天就给大家介绍一位蛋白表达 “快枪手”——Expi293F 细胞.
一句话简介:Expi293F 是赛默飞专为高产瞬时蛋白表达优化的悬浮 HEK293 亚系,转染效率优异,蛋白表达量可达 1‑2g/L,是悬浮蛋白表达的优选细胞.
HEK293 为初代母细胞(1973 年建系),后续衍生出多条常用亚型: ‑ 293T:转入 SV40 大 T 抗原,转染效率高,贴壁生长,最常用于常规转染实验 ‑ 293F:经过驯化 可悬浮培养的 HEK293 克隆株 ‑ FreeStyle 293‑F:适配无血清悬浮培养基的 293F 亚型 ‑ Expi293F:293F 经过进一步筛选得到的高产悬浮克隆株(本文主角) ‑ Expi293F GnTI‑:糖基化修饰简化版本 ‑ Expi293F Inducible:四环素诱导表达版本
简单来讲,Expi293F 就是 293F 的高产升级版. 官方资料指出:相较于普通 293 细胞,Expi293F 转染效率更高,瞬时转染后的蛋白产量大幅提升,最高可达到 1‑2g/L,属于悬浮 293 系统当中产量表现第一梯队的细胞.
⚠️重点提醒:不要习惯性设置 5% CO₂,低二氧化碳浓度极易造成细胞状态变差 增殖迟缓.
必须使用 Expi293F 专用培养基,普通 293 悬浮培养基无法满足其生长需求.
实操小贴士:生长速度快可按 1:4‑1:5 比例分瓶;长势缓慢选择 1:2‑1:3;优先计数再传代,不要盲目的按天数分瓶;吹打力度适中,防止剪切力损伤细胞.
❗禁止将冻存管直接浸入液氮液体,存在冻存管炸裂风险.
✅优先选用 Expi293F 重组蛋白 抗体(scFv)瞬时高产量表达;慢病毒 AAV 病毒包装放大;膜蛋白表达;结构生物学,需要获取大量蛋白用于结晶 冷冻电镜实验.
❌不推荐选用 Expi293F 需要贴壁生长 细胞极性的实验;基础教学培养;蛋白产量需求较低的常规小试,选用 293T 普通 293F 性价比更高.
293T:贴壁,蛋白产量中等,适合常规转染 293F:悬浮,产量中高,适合前期悬浮条件摸索 Expi293F:悬浮,高产 (1‑2g/L),适合大规模蛋白 / 抗体制备 Expi293F GnTI‑:悬浮高产,适合需要简化糖基化修饰的研究
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