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SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒

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 SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒(SDS-PAGE Gel Quick Preparation Kit)提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制SDS-PAGE胶(即SDS聚丙烯酰胺凝胶)。

本试剂盒中把凝胶配制所需的缓冲试剂、SDS等预混合成下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X),简化了凝胶配制的步骤。下层胶缓冲液中含Tris pH8.8及适量SDS,上层胶缓冲液中含Tris pH6.8及适量SDS。
本试剂盒约可配制30-50块常规大小的PAGE胶。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
P0012AC-1 30% Acr-Bis (29:1) 100ml
P0012AC-2 下层胶缓冲液(4X) 70ml
P0012AC-3 上层胶缓冲液(4X) 30ml
P0012AC-4 凝胶聚合催化剂 0.5g
P0012AC-5 TEMED 0.5ml
说明书 1份

保存条件:
下层胶缓冲液(4X)、上层胶缓冲液(4X)和凝胶聚合催化剂室温保存。30% Acr-Bis (29:1)和TEMED 4℃避光保存。凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
注意事项:
凝胶聚合催化剂配制成10%溶液后,应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。
TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
温度较低时,下层胶缓冲液(4X)和上层胶缓冲液(4X)中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
TEMED易燃,有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其他物品。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

使用说明:
1. 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度,再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶):
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围:

SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 50-150kD
8%胶 30-90kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-40kD

 

成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
6%胶 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.7 5.4 8.1 10.8 16.2 27
30%Acr-Bis(29:1) 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0
下层胶缓冲液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.024 0.04
成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
8%胶 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.4 4.7 7.1 9.5 14.2 23.7
30%Acr-Bis(29:1) 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3
下层胶缓冲液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.018 0.03
成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
10%胶 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.0 4.1 6.1 8.1 12.2 20.3
30%Acr-Bis(29:1) 1.7 3.3 5.0 6.7 10.0 16.7
下层胶缓冲液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
12%胶 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 1.7 3.4 5.1 6.8 10.2 17.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0
下层胶缓冲液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
成分 配制不同体积SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)
15%胶 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 1.2 2.4 3.6 4.8 7.2 12.0
30%Acr-Bis(29:1) 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 25.0
下层胶缓冲液(4X) 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%凝胶聚合催化剂 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02

2. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称堆积胶、积层胶或上层胶):

成分 配制不同体积SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)
5%胶 2 3 4 6 8 10
蒸馏水 1.17 1.75 2.33 3.5 4.7 5.8
30%Acr-Bis(29:1) 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7
上层胶缓冲液(4X) 0.5 0.75 1 1.5 2 2.5
10%凝胶聚合催化剂 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01

 

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