试验前请仔细阅读说明书，本产品仅供科研实验使用。
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2. 试剂盒方面提供技术指导，Elisa试剂盒还可以提供代检测服务。
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以下情况不予办理退换货：
1、已超过受理期限的产品，如过保质期。
2、由于客户自身操作原因导致实验失败。
3、由于客户没有仔细确认要订购的指标，导致自己的指标定错。
4、产品已使用（质量问题除外）。
产品简介
本品采用双抗夹心法检测样本中 Benzonase 含量。将 Benzonase 特异性抗体预包被在微孔板上，使用时将标准品与待测样本分别加入到已 包被特异性抗体的反应孔内，样本中的 Benzonase 会与微孔板中的抗体结合，孵育后洗涤以去除微孔板内未结合的物质，加入 Benzonase 检测 抗 体（HRP 标记） ，形成抗体 - 抗原 -HRP 标记抗体的复合物，加入 TMB 进行孵育显色，显色程度与 Benzonase 浓度成比例关系，通过测定 Benzonase 标准品的显色来判断样本中 Benzonase 残留程度。
检测范围： 0.094~6 ng/ml
定 量 限： 0.094 ng/ml
检 测 限： 0.019 ng/ml
产品组成：
| 组分 | 组分 ( 中文 ) | 规格 |
| Benzonase Standard | Benzonase 标准品 | 1000 ng/ml, 0.8 ml, 1 Vial |
| Benzonase Detection Antibody (HRP labeled) | Benzaonase 检测抗体（HRP 标记） | 12 ml, 1 Vial |
| TMB Substrate | TMB 底物 | 12 ml, 1 Vial |
| Stop Solution | 终止液 | 12 ml, 1 Vial |
| Sample Diluent | 样品稀释液 | 50 ml, 1 Vial |
| Wash Buffer (20×) | 漂洗液 | 50 ml, 1 Vial |
| Microtiter Plate (Coated) | 预包被酶标板 | 96 孔 , 1 Plate |
所需器材：酶标仪、微孔板恒温振荡器、涡旋振荡器、移液器、封板膜等。
试剂配制
1. 平衡：将所需试剂转移到室温（25 ± 3℃) 平衡至少 30 min；确定测定运行的孔数， 取出所需的酶标条， 其它放回装有干燥剂包的铝箔袋中， 然后重新密封并置于 2~8℃保存。
2. 1 × 漂洗液配制：根据本次试验所需洗板液体积，量取漂洗液（20× )适量，用去离子水按照 1:20 体积比稀释，混匀后备用。
3. 标准品溶液配制（示例）：
|
序号 |
标准液浓度（ng/ml） |
标准液体积(μl） |
稀释液体积(μl） |
总体积(μl） |
终浓度（ng/ml） |
剩余体积(μl） |
| StA | 1000 | 20 | 180 | 200 | 100 | 170 |
| St8 | 100 | 30 | 470 | 500 | 6 | 250 |
| St7 | 6.0 | 250 | 250 | 500 | 3.0 | 250 |
| St6 | 3.0 | 250 | 250 | 500 | 1.5 | 250 |
| St5 | 1.5 | 250 | 250 | 500 | 0.75 | 250 |
| St4 | 0.75 | 250 | 250 | 500 | 0.375 | 250 |
| St3 | 0.375 | 250 | 250 | 500 | 0.188 | 250 |
| St2 | 0.188 | 250 | 250 | 500 | 0.094 | 250 |
| St1(Blank) | / | / | 300 | 300 | 0 | 300 |
实验流程
1. 混匀：临用前将平衡至室温的试剂轻轻混匀。
2. 加样：分别加入 100 μl 标准品溶液 (St1~St8) 或待测样品至相 应孔中，加盖或封板膜封板后在室温（25 ± 3 ℃)条件下 400~500 rpm 孵育 1 h。
3. 洗涤：甩掉孔内液体，每孔加入至少 1× 漂洗液 350 μl （可用 多通道移液器或者洗瓶） ，再甩去孔内液体后于无尘纸上轻拍至拍干。 重 复 3 次。（注意： 在 加入 Benzonase 检 测抗 体溶 液 前勿使 板孔 长 时间过分干燥。洗涤不当可能使复孔间 CV 值偏大， 信号偏高或偏低） 。
4. 标记：每孔加入 Benzonase 检测抗体（HRP 标记）溶液 100 μl ，加盖或封板膜封板后在室温（25 ± 3℃ )条件下 400~500 rpm 孵育 30 min。
5. 洗涤：甩掉孔内液体，每孔加入至少 1× 漂洗液 350 μl （可用 多通道移液器或者洗瓶） ，再甩去孔内液体后于无尘纸上轻拍至拍干。 重复 3 次。（注意：在加入 TMB 底物前勿使板孔长时间过分干燥）
6. 显色：每孔加入 TMB 底物 100 μl ，室温（25 ± 3℃)避光显 色 20 min。
7. 终止：每孔加入终止液 100 μl，轻轻敲击孔板使混匀， 终止反应。 8. 测定：加入终止液后 10 min 内，在 450 nm 波长处读取吸光值。
结果计算
本品建议采用浓度取 10 为底的对数后采用四参数 Logistic 模型拟 合方式进行拟合计算。
| 标准品浓度（ng/ml） | 吸光值 | ||
| 测定 1 | 测定 2 | 均值 | |
| 6 | 1.770 | 1.778 | 1.774 |
| 3.0 | 1.088 | 1.153 | 1.121 |
| 1.5 | 0.704 | 0.658 | 0.681 |
| 0.75 | 0.386 | 0.417 | 0.401 |
| 0.375 | 0.241 | 0.241 | 0.241 |
| 0.188 | 0.154 | 0.169 | 0.161 |
| 0.094 | 0.116 | 0.122 | 0.119 |
| 0 | 0.082 | 0.082 | 0.082 |
典型标准曲线图谱（四参数 Logistic 模型）
产品性能
检测限：0.019 ng/ml。将 20 个空白对照的平均吸光值加上 2 个标准偏差 后代入标曲确定。
定量限： 0.094 ng/ml。确保变异系数 (n=6) 在 20% 以内的最低浓度。
线性：测定不同浓度的标准品溶液，并绘制曲线， R2≥0.98。
重复性：三个已知浓度样品重复测试 20 次，评估重复性。
中间精密度：三个已知浓度样品不同时间不同人测试 4 次，评估中间精 密度。
| 名称 | 重复性（n=20） | 中间精密度（n=4） | ||||
| 低浓度 | 中间浓度 | 高浓度 | 低浓度 | 中间浓度 | 高浓度 | |
| 均值（ng/ml） | 0.28 | 0.92 | 4.55 | 0.28 | 0.92 | 4.49 |
| SD | 0.035 | 0.075 | 0.371 | 0.037 | 0.078 | 0.343 |
| CV（%） | 12.4 | 8.2 | 8.1 | 13.1 | 8.6 | 7.6 |
注意事项
1. 本产品仅用于科研，不能用于临床诊断或治疗。
2. 试剂应该按照标签标明的条件进行储存，试剂和待测样本使用 前应平衡至室温。
3. 预包被酶标板使用前，应平衡至室温后再打开包装袋取用，剩 余的板条应立即放回包装中重新密封， 置于 2~8℃保存。剩余试剂也 应重新密封后按标签标明的条件进行储存。
4. Benzonase 标准品、 Benzonase 检测抗体（HRP 标记）溶液 应混匀后再使用。
5. 洗涤过程中板孔残留的液体应在洁净的无尘纸上拍干，拍干后 的板孔不宜长时间过分干燥，否则不恰当的洗涤过程会造成复孔的 CV 值偏高或者空白（0 ng/ml）吸光值偏高，影响结果准确性。
6. TMB 底物应该是无色透明液体，如果显示淡蓝色，证明该溶液 已经被污染，不适合进行后续分析使用。
7. 样本处在极端 pH 值（<5.0 或 >8.5） ，或者含高盐、高聚糖、 高尿素、高有机溶剂和高的去污剂的溶液中，均有可能导致较低回收 率。
8. 由于生物样本基质的复杂性，建议每次试验加阳性质控试验样 品，确保试验的准确性，并采用复孔进行试验。
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