试验前请仔细阅读说明书,本产品仅供科研实验使用。
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以下情况不予办理退换货:
1、已超过受理期限的产品,如过保质期。
2、由于客户自身操作原因导致实验失败。
3、由于客户没有仔细确认要订购的指标,导致自己的指标定错。
4、产品已使用(质量问题除外)。
BL21 Star(DE3): 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB- ) gal dcm rne131 (DE3)
BL21 Star(DE3) Chemically Competent Cell
产品说明
BL21 Star(DE3)菌株源于BL21(DE3)菌株,含有rne131突变(RNaseE基因),RNaseE基因的突变降低了內源RNase的积累,增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而提高异源蛋白的表达水平。主要适用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达,同时含有大肠杆菌RNA聚合酶,也可用于非T7启动子表达载体(pGEX,pMAL等)的蛋白表达。由于BL21 Star(DE3)菌株的异源基因基础表达水平较高,所以不适合毒性蛋白的表达。BL21 Star(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg DNA。
操作方法
1. BL21 Star(DE3) 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
试验前请仔细阅读说明书,本产品仅供科研实验使用。
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文献名称
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