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明胶弗洛拿缓冲液Gelatin Veronal Buffer with Mg++ and EGTA(GVBMG)
概述
GVBE是一种等渗缓冲液,用于补体测定中防止补体激活或在孵育结束时停止正在进行的补体激活(Morgan, B.P. (2000); Dodds, A.W. and Sim, R.B. (1997))。
缓冲液成分
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EDTA:用于螯合钙和镁,从而抑制所有三种补体激活途径。
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Veronal:作为缓冲剂,因其在pH范围7.2-7.4内不螯合金属离子且不抑制补体反应。
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氯化钠:提供等渗环境,防止细胞因渗透压而裂解。
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明胶:防止蛋白质成分在稀释和测定过程中吸附到吸头或管壁上。
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叠氮化钠:防止细菌生长。
物理特性
该缓冲液中的明胶浓度低于形成固体凝胶的浓度。然而,由于明胶在4℃时接近其凝胶浓度,因此在静置时会形成一些明胶丝。这些明胶丝可以通过加热至37℃或在微波炉中短暂加热重新溶解。
应用
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停止补体激活:在测定结束时添加GVBE以停止补体激活,并将反应稀释至可进行分光光度法读取的水平。
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对照测定:用于设置不应发生补体激活的对照测定(背景对照测定)。
规格或纯度
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明胶:0.1%
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Veronal:5 mM
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氯化钠:145 mM
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叠氮化钠:0.025%
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EDTA:10 mM
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pH值:7.3
注意事项
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储存条件:建议在4℃储存,避免冻结。
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使用前处理:如有明胶丝形成,需加热至37℃或微波加热溶解后使用。