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Gelatin Veronal Buffer (GVB)明胶弗洛拿缓冲液
概述
明胶弗洛拿缓冲液(GVB)是一种等渗缓冲液,专为补体旁路途径的实验设计。它不含钙离子(Ca²⁺)和镁离子(Mg²⁺),适用于制备兔红细胞(Er)以及稀释补体旁路途径实验的所有组分。GVB能够维持实验体系的稳定性,防止非特异性补体激活。
主要成分
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明胶(Gelatin):0.1%,防止蛋白质吸附。
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Veronal缓冲液:5 mM,提供稳定的pH环境。
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氯化钠(NaCl):145 mM,维持等渗条件。
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叠氮化钠(NaN₃):0.025%,抑制细菌生长。
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pH值:7.3,适合补体系统的活性维持。
物理特性
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外观:透明液体,可能因明胶的存在在低温下形成轻微凝胶状物质。
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溶解性:明胶在37℃或微波加热后可完全溶解。
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储存条件:2-8℃保存,避免冻结。
应用
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兔红细胞(Er)的制备:
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使用GVB缓冲液制备兔红细胞(Er),并在实验前清洗以去除杂质。
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补体旁路途径实验:
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用于稀释补体成分、兔红细胞及其他实验试剂。
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补体活性测定:
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作为反应缓冲液,维持补体旁路途径的活性。
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使用说明
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兔红细胞(Er)制备:
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将兔红细胞与GVB缓冲液混合,制备Er悬液。
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使用GVB清洗Er,去除未结合的杂质。
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Gelatin Veronal Buffer (GVB)明胶弗洛拿缓冲液
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实验试剂稀释:
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使用GVB稀释补体成分、兔红细胞及其他试剂,确保实验条件一致。
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补体旁路途径测定:
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在GVB中进行补体旁路途径的反应,测定补体活性。
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注意事项
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明胶溶解:若缓冲液在低温下形成凝胶状物质,需加热至37℃或微波加热溶解后使用。
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细菌污染:叠氮化钠可抑制细菌生长,但仍需无菌操作以避免污染。
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储存条件:避免冻结,2-8℃保存,使用前恢复至室温。