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HCT116细胞hMAP2K1基因点突变细胞株

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  • 产品简称:HCT116 hMAP2K1 p.P124L

  • 基因名称:hMAP2K1(MEK1)

  • 突变类型:NM_002755.4 (c.371C>T, p.Pro124Leu)

  • 基因ID:5604 (NCBI Gene)

  • 克隆类型:纯合子(Homozygous)

  • 转导方法:CRISPR/Cas9 基因编辑(蛋白法递送)

  • 细胞鉴定:Sanger测序 + PCR验证

  • HCT116细胞hMAP2K1基因点突变细胞株背景

    • 种属来源:人(Homo sapiens)

    • 组织来源:结肠癌(Colon carcinoma)

    • 疾病特征:微卫星不稳定(MSI+),p53野生型,KRAS突变(G13D)

    • 亲本细胞:HCT116(ATCC® CCL-247™)

    • 细胞形态:上皮样,贴壁生长

    • 培养条件

      • 基础培养基:McCoy's 5A Modified Medium

      • 补充成分:10% FBS(胎牛血清) + 1% Penicillin-Streptomycin(P/S)

      • 配套培养基货号:TCH-G185

      • 培养环境

        • 温度:37℃

        • CO₂浓度:5%

        • 湿度:饱和湿度

      • 传代方法

        • 消化试剂:0.25% Trypsin-EDTA

        • 传代比例:1:3~1:8(视生长密度调整)

        • 传代周期:48~72小时

        • 冻存与复苏

          • 冻存液配方:60%基础培养基 + 30% FBS + 10% DMSO

          • 推荐冻存密度:1×10⁶ cells/mL

          • 储存条件:液氮(-196℃)或超低温冰箱(-150℃)

          • 质量控制

            • 无菌检测:细菌、真菌、支原体检测阴性(ISO 9001认证)

            • STR鉴定:人源细胞STR图谱匹配

            • 突变验证:Sanger测序确认p.P124L突变

            • 应用方向

              ✔ MAPK/ERK信号通路研究(MEK1功能研究)
              ✔ 肿瘤耐药机制探索(MEK抑制剂敏感性实验)
              ✔ 基因编辑对照细胞(CRISPR/Cas9基因修饰对照)
              ✔ 药物筛选模型(靶向MEK的抗癌药物测试)

            • HCT116细胞hMAP2K1基因点突变细胞株注意事项

              ⚠ 建议定期检测突变稳定性(传代20代内使用最佳)
              ⚠ 避免反复冻融,推荐使用低代次细胞进行实验
              ⚠ 培养时若出现异常形态,建议重新复苏备用细胞

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